[發明專利]一種納米鋁佐劑/自體腫瘤疫苗的制備方法無效
| 申請號: | 201410166708.4 | 申請日: | 2014-04-23 |
| 公開(公告)號: | CN103948921A | 公開(公告)日: | 2014-07-30 |
| 發明(設計)人: | 張東生;劉慧;杜益群;張皓 | 申請(專利權)人: | 東南大學 |
| 主分類號: | A61K39/39 | 分類號: | A61K39/39;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司: | 江蘇永衡昭輝律師事務所 32250 | 代理人: | 王斌 |
| 地址: | 210096*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 納米 佐劑 腫瘤 疫苗 制備 方法 | ||
1.一種納米鋁佐劑/自體腫瘤疫苗的制備方法,其特征在于,該方法包括以下步驟:
1)制備納米鋁佐劑:
按質量比1:1:1將苯扎溴銨、正辛醇、環己烷高速混合后攪拌均勻,得到的混合溶液置入磁力攪拌器上,按正辛醇與AlCl3質量比1:1.3~1.5,將后者加入所述混合溶液中攪拌20min以上,然后按20~30滴/min的速度向混合溶液中滴加氨水,保持反應體系PH>10反應2h,得到乳濁液;
向所述乳濁液中加入丙酮,至乳濁液變清,以>500rpm的速度離心,棄去上清液,得到沉淀物;最后將沉淀物先后用雙蒸水、乙醇離心洗滌各三次后,置于干燥箱中干燥,即得到納米鋁佐劑;
2)制備納米鋁佐劑/自體腫瘤疫苗:
將H22肝癌細胞懸液與濃度為2~4mg/ml的納米鋁佐劑4℃共孵育7天,即得到納米鋁佐劑/自體腫瘤疫苗。
2.根據權利要求1所述的納米鋁佐劑/自體腫瘤疫苗的制備方法,其特征在于,所述步驟2)中,H22肝癌細胞懸液是按照如下方法制備的:小鼠腹腔接種H22肝癌細胞,待腹水產生后,無菌條件下抽取腹水,離心取沉淀,加入磷酸鹽緩沖液制備成濃度為1×108~3×108個/ml細胞懸液,將細胞懸液經65℃30min水浴處理后即可。
3.一種納米鋁佐劑/自體腫瘤疫苗,其特征在于,該疫苗是按照權利要求1或2所述方法制備得到。
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