[發明專利]一種包裹有超氧化物歧化酶聚電解質微囊的制備方法

有效

• 申請號: 201410161591.0
• 申請日: 2014-04-17
• 公開（公告）號: CN105012273B
• 公開（公告）日: 2019-03-01
• 發明（設計）人: 張峰;劉進;魏建民;侯靜
• 申請（專利權）人: 內蒙古農業大學
• 主分類號: A61K9/52
• 分類號: A61K9/52;A61K38/44;A61K47/32;A61P39/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種包裹有銅鋅超氧化物歧化酶聚電解質微囊的制備方法，其特征是基于層層自組裝原理，采用陰離子聚電解質PSS和陽離子聚電解質PAH作為聚電解質微囊組裝材料，將具有抗氧化功能的銅鋅超氧化物歧化酶包裹于微囊之中制備而成，所述制備方法中實驗步驟包括：銅鋅超氧化物歧化酶與碳酸鈣納米顆粒共聚物的制備、聚電解質包裹銅鋅超氧化物歧化酶與碳酸鈣納米顆粒共聚物、碳酸鈣模板的移除及銅鋅超氧化物歧化酶活性的恢復，所述陰離子聚電解質PSS為聚苯乙烯磺酸鈉、陽離子聚電解質PAH為聚烯丙基胺鹽酸鹽。

2.如權利要求1所述的一種包裹有銅鋅超氧化物歧化酶聚電解質微囊的制備方法，其步驟如下：

A、銅鋅超氧化物歧化酶與碳酸鈣納米顆粒共沉淀：取一定的CaCl₂溶液加入離心管中，加入等量的銅鋅超氧化物歧化酶，靜置，再加入等量的Na₂CO₃溶液，立刻用移液槍吹打，混合均勻，12000rpm離心30s，棄上清，得沉淀，即為銅鋅超氧化物歧化酶與碳酸鈣納米顆粒共聚物；

B、聚電解質包裹銅鋅超氧化物歧化酶與碳酸鈣納米顆粒共聚物：(1)向銅鋅超氧化物歧化酶與碳酸鈣納米顆粒共聚物中加入1ml PAH溶液，用移液槍反復吹打，懸浮吸附10min，12000rpm離心30s，除去上清液，沉淀用蒸餾水洗滌3次，置于粒度儀中，測定電位，電位圖呈現完整的單峰；(2)向包裹有PAH的碳酸鈣納米顆粒中加入1ml的PSS溶液，用移液槍反復吹打，懸浮吸附10min，12000rpm離心30s，除去上清液，沉淀用蒸餾水洗滌3次，置于粒度儀中，測定電位，電位圖呈現完整的單峰；(3)重復上述操作6次，便可制得包裹有6層PAH/PSS薄膜的碳酸鈣納米顆粒；

C、碳酸鈣模板的移除及銅鋅超氧化物歧化酶活性的恢復：(1)向聚電解質微囊溶液中加入0.2M的乙二胺四乙酸，攪拌，直到沉淀完全溶解，溶液變為無色；(2)向溶液中加入與乙二胺四乙酸等體積且濃度均為0.4M的Cu²⁺和Zn²⁺，靜置10min，即制得包裹有銅鋅超氧化物歧化酶的聚電解質微囊。

3.如權利要求2所述的一種包裹有銅鋅超氧化物歧化酶聚電解質微囊的制備方法，其特征在于，所述包裹銅鋅超氧化物歧化酶與碳酸鈣納米顆粒共聚物的聚電解質微囊組裝材料為陰離子聚電解質PSS和陽離子聚電解質PAH，所述聚電解質微囊組裝材料有效阻隔胰蛋白酶等水解酶類與銅鋅超氧化物歧化酶的接觸，避免水解作用的發生，且不影響銅鋅超氧化物歧化酶的抗氧化功能。