[發明專利]一種肝素含量的檢測方法

在審

• 申請號: 201410159017.1
• 申請日: 2014-04-21
• 公開（公告）號: CN104048931A
• 公開（公告）日: 2014-09-17
• 發明（設計）人: 趙鐵銘
• 申請（專利權）人: 上海貞元診斷用品科技有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/78
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種肝素含量的檢測方法，其特征是通過發色底物法，將待測樣品與FXa活性檢測試劑混合并孵育后，檢測發色底物的信號強度；最后通過計算信號強度并和標準曲線比對獲得待測樣品中肝素含量，其中發色底物為活化因子X?(FXa)的發色底物，選自以下底物中的任一一種：?

Benzoyl-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitroanilide·HCl；CH₃O-CO-D-CHA-Gly-Arg-p-nitroanilide·AcOH；Acetyl-D-Arg-Gly-Arg-p-nitroanilide·2HCl；

4-Nz-D-Arg-Gly-Arg-p-nitroanilide?·2HCl。

2.根據權利要求1所述的肝素含量的檢測方法，其特征在于：當檢測待測樣品中的肝素含量時，所述FXa活性檢測試劑包括試劑1和試劑2，其中，試劑1為活化因子X?(FXa)的發色底物，試劑2為活化因子X?(FXa)。

3.根據權利要求1所述的肝素含量的檢測方法，其特征在于：當檢測待測樣品中的肝素含量時，上述FXa活性檢測試劑包括試劑1、2和3，其中，試劑1為活化因子X?(FXa)的發色底物，試劑2為活化因子X?(FXa)，試劑3為抗凝血酶。

4.根據權利要求1~3任一所述的肝素含量的檢測方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

步驟a，標準曲線的制作：根據不同肝素濃度的標準品及其相應的信號強度繪制標準曲線；

步驟b，待測樣品處理：獲得待測樣品的血漿，與上述FXa活性檢測試劑混合并孵育；

步驟c，檢測待測樣品中發色底物的信號強度；

步驟d，通過計算待測樣品中信號強度并和標準曲線比對獲得待測樣品中肝素含量。

5.根據權利要求4所述的肝素含量的檢測方法，其特征在于，當無需考慮被檢者內源抗凝血酶表達水平時，步驟b中待測樣品的處理順序為：將待測樣品與試劑1混合并孵育后，再加入試劑2混合并孵育。

6.根據權利要求4所述的肝素含量的檢測方法，其特征在于，當需要考慮被檢者內源抗凝血酶表達水平時，步驟b中待測樣品的處理順序為：將待測樣品與試劑3混合并孵育后，再與試劑1混合并孵育后，再加入試劑2混合并孵育。

7.根據權利要求5或6所述的肝素含量的檢測方法，其特征在于，步驟b中待測樣品血漿與試劑1的體積比為1：1，在37?oC下混合并孵育2分鐘。

8.根據權利要求5或6所述的肝素含量的檢測方法，其特征在于，步驟b中待測樣品血漿與試劑2的體積比為1：1，在37?oC下混合并孵育2分鐘。

9.根據權利要求6所述的肝素含量的檢測方法，其特征在于，步驟b中待測樣品血漿與試劑3的體積比為1：1，在37oC下混合并孵育2分鐘。

10.根據權利要求1~9任一所述的肝素含量的檢測方法，其特征在于，所述肝素含量的檢測方法應用于自動檢測儀上進行檢測的具體條件為：反應溫度：37oC；檢測波長：405nm；檢測方法：終點法或動態法。