[發明專利]一種蘋果綿蚜蠟腺孔觀察方法

無效

• 申請號: 201410156956.0
• 申請日: 2014-04-18
• 公開（公告）號: CN103947609A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 周洪旭;譚秀梅;孫立寧;趙川德
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: A01K67/033
• 分類號: A01K67/033;G01N1/28;G01N21/84;A01N1/00
• 代理公司: 北京一格知識產權代理事務所(普通合伙) 11316
• 代理人: 陳真

技術領域

本發明涉及一種蘋果綿蚜形態學鑒定方法，具體涉及一種蘋果綿蚜蠟腺孔觀察方法，屬于植物保護領域。

背景技術

蘋果綿蚜（Eriosoma?lanigerum?(Hausmann)）隸屬于半翅目(Hemiptera)、綿蚜科(Pemphigidae)、綿蚜屬(Eriosoma?Leech)，又名血色蚜蟲、赤蚜、綿蚜，是國內外檢疫對象之一，也是蘋果屬的重要檢疫性害蟲。蘋果綿蚜的成蚜和若蚜形態相似，無翅孤雌蚜的成蚜近橢圓形，赤褐色，體側具有瘤狀突起物，著生短毛，身體被有白色蠟質綿絮物，有翅胎生雌蚜身體暗褐色，頭及胸部黑色，體表覆蓋白色綿絮物，比無翅胎生成蚜少。若蚜共4齡，身體略呈圓筒狀，體色赤褐，喙細長，向后延伸。觸角5節，身體被有白色綿絮物，有翅若蚜身體兩側有黑色翅芽。

蘋果綿蚜可周年在蘋果樹體地上、地下部寄生刺吸樹液，同時可以分泌唾液消化酶，刺激寄生組織增生形成腫瘤，影響蘋果樹的營養輸導。并且，蘋果綿蚜分泌白色蠟質綿絮物和排泄物蜜露，其中蜜露的主要成分為氨基酸和糖，是許多致病性及腐生性真菌（如煙霉菌(煤怠菌Gloeoaes?Pomigena)）的理想培養基，煙霉菌可造成樹體及葉片發黑，使葉片光合作用降低，并且使果實表面形成果銹、污斑，影響果實的美觀和味感，因此防治蘋果綿蚜成為影響蘋果種植業的關鍵因素。

蘋果綿蚜體背的白色蠟質綿絮物是由體內泌蠟腺分泌，通過體壁的蠟腺孔排泄到體外。蘋果綿蚜的背面有4條縱列的蠟腺孔，其有一定排列特征和分布規律，可以分泌白色蠟質綿絮物，對于蘋果綿蚜的生命活動具有重要的作用：綿絮物可以包裹粘稠的蜜露，使蜜露免受污染，同時避免蘋果綿蚜移動時受蜜露粘縛和覆蓋，保持正常生理活動；減少真菌的污染；綿絮物能夠保護蘋果綿蚜免受雨水沖刷和捕食者、寄生者的傷害；同時，綿絮物可反射紫外線和太陽輻射，減少其對蘋果綿蚜的傷害，并降低水分散失；此外，綿絮物包裹著蘋果綿蚜，易被人、動物、交通工具等攜帶傳播到非疫區，有利于擴散蔓延。

從1914年蘋果綿蚜傳入我國威海后，一個世紀以來，已傳入到我國的大部分蘋果產區，對蘋果的產量和品質影響嚴重。而關卡檢疫中對蘋果綿蚜的鑒別主要依據外部形態學方法，而僅僅依據外部形態學方法，往往錯檢或漏檢，造成蘋果綿蚜進一步擴大蔓延。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對目前僅依靠外部形態特征鑒定蘋果綿蚜的不足，提供一種蘋果綿蚜蠟腺孔觀察方法，通過研究蘋果綿蚜蠟腺孔數目、排列特征和分布規律，了解蘋果綿蚜分泌綿絮的生理過程和功能，準確鑒定蘋果綿蚜、控制其傳播蔓延，為關卡檢疫中正確識別蘋果綿蚜以及防止擴散蔓延提供依據；該方法具有準確性高、操作性強的優點，適用于關卡檢疫中的快速檢疫。

為了達到上述目的，本發明是這樣實現的：

一種蘋果綿蚜蠟腺孔觀察方法，包括以下步驟：

（1）樣本采集：5～6月份蘋果綿蚜危害期，選擇受藥劑影響小的蘋果樹，用剪刀剪下帶有蘋果綿蚜的枝條，輕拿輕放蘋果枝，防止蟲體從枝條上掉落；用剪刀將蘋果葉剪下，僅留有葉柄，防止蘋果枝蒸騰過大影響蘋果綿蚜生存；將處理好的蘋果枝插入裝有三分之二水的1000mL大燒杯中，用紗布把燒杯口封住，放于陰涼通風處備用；

（2）蘋果綿蚜初處理：選取一個蘋果綿蚜蟲落，用鑷子把覆蓋在蘋果綿蚜蟲落上的綿絮去掉，用毛筆輕輕把蟲落掃至培養皿中，于雙目實體解剖鏡下分齡期，在此過程中，要輕柔地掃落或挑取蘋果綿蚜，防止肢體損傷；將蘋果綿蚜掃落到培養皿中后，用體積濃度為70-90%酒精反復清洗蘋果綿蚜3次，使其身上的蠟質和綿絮同蚜體分離；最后將各齡期蘋果綿蚜分別放入指形管中，用體積濃度為70-80%酒精浸漬24小時以上待用；

（3）蘋果綿蚜脫脂處理：將步驟2中不同齡的蘋果綿蚜從指形管中取出，用昆蟲針在其腹部扎一小孔，然后放到盛有體積濃度為70-80%酒精的指形管中靜置浸泡24-48h；然后將蘋果綿蚜從酒精溶液中取出，并用蒸餾水在培養皿中沖洗2-3次，不同齡期的蘋果綿蚜分別浸泡于質量濃度為8-15%的氫氧化鈉溶液中，并置于37℃的恒溫箱中放置36-48h，至蟲體發白透明后，從氫氧化鈉溶液中取出，用蒸餾水清洗3次，并再次用昆蟲針在其腹部扎另一小孔，然后將蘋果綿蚜按齡期轉移到裝有體積濃度為70-80%酒精溶液的指形管中，再次靜置至蟲體透明為止；