[發明專利]一種檢測HPV的試劑盒有效
| 申請號: | 201410154175.8 | 申請日: | 2014-04-17 |
| 公開(公告)號: | CN103898241A | 公開(公告)日: | 2014-07-02 |
| 發明(設計)人: | 林金明;林雪霞;劉全利;李海芳 | 申請(專利權)人: | 清華大學 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京聿宏知識產權代理有限公司 11372 | 代理人: | 吳大建;歐穎 |
| 地址: | 100084 北京市海淀區1*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 檢測 hpv 試劑盒 | ||
1.一種檢測HPV的試劑盒,其特征在于,包括如下組分,
1)等溫擴增反應液:所述等溫擴增反應液中包含RNA反轉錄酶、RNA聚合酶、RNA酶H、用于擴增HPV的引物、擴增反應緩沖液、金屬離子溶液、還原劑溶液、dNTP和NTP;
2)芯片毛細管電泳緩沖液:所述芯片毛細管電泳緩沖液中包含分離緩沖液、染料和甲酰胺。
2.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述引物選自用于檢測HPV16型的引物,且所述引物的序列為如SEQ?ID?NO:1和SEQ?ID?NO:2所示的序列。
3.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述RNA反轉錄酶選自AMV反轉錄酶,RNA聚合酶選自T7RNA聚合酶。
4.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在于,在組分1)的等溫擴增反應液中,RNA反轉錄酶、RNA聚合酶和RNA酶H組合成一種溶液,而組分1)中其余成份組合成另一種溶液。
5.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在于,在組分2)中的芯片毛細管電泳緩沖液組合為一種溶液。
6.根據權利要求4所述的試劑盒,其特征在于,所述RNA酶H、RNA反轉錄酶和RNA聚合酶的酶活單位的比例為1-6:50-100:350-600,優選其比例為2:60:500。
7.根據權利要求1-5中任意一項所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中還包括內標,所述內標序列選自如SEQ?ID?NO:3所示的序列,且內標的引物序列為如SEQ?ID?NO:4和SEQ?ID?NO:5所示的序列。
8.根據權利要求1-7中任意一項所述的試劑盒,其特征在于,組分1)的等溫擴增反應液中還包括DMSO,優選其在組分1)中不與其他成份形成混合液。
9.一種用于檢測HPV16型的引物對,其特征在于,其序列為如SEQ?ID?NO:1和SEQ?ID?NO:2所示的序列。
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