[發明專利]從發酵液中提取ARA的方法

有效

• 申請號: 201410153599.2
• 申請日: 2014-04-17
• 公開（公告）號: CN103922921A
• 公開（公告）日: 2014-07-16
• 發明（設計）人: 李悅明;徐建春;李霞;王道會
• 申請（專利權）人: 青島瑯琊臺集團股份有限公司
• 主分類號: C07C57/03
• 分類號: C07C57/03;C07C51/42
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 張紅鳳

技術領域

本發明屬于二十碳四烯酸的提取技術領域，具體涉及一種從發酵液中提取二十碳四烯酸的方法。

背景技術

ARA(AA)學名二十碳四烯酸，又名花生四烯酸，屬Omega6族長鏈多元不飽和脂肪酸。在幼兒時期ARA屬于必需脂肪酸，但是在嬰幼兒期，寶貝體內合成ARA的能力較低，因此對于正處于體格發育黃金期的寶貝來說，在食物中提供一定的ARA，會更有利于其體格的發育。ARA還具有重要的營養價值，作為人母乳的天然成分，ARA對于嬰兒的神經及生理的發育必不可少，已被多個專業組織包括世界衛生組織推薦作為營養補充劑添加到嬰兒配方奶粉中。ARA的缺乏對于人體組織器官的發育,尤其是大腦和神經系統發育可能產生嚴重不良影響。

ARA具有一系列生理活性，已被廣泛應用于醫藥、食品、化妝品、飼料行業。ARA作為合成人體前列腺素、凝血噁烷以及白三烯的前體物質，具有廣泛的生物活性，對高血壓、高血脂、糖尿病、病毒感染等疾病的預防和治療均有顯著效果；ARA具有保護皮膚的功能，在功能上與γ－亞麻酸（GLA）相似（GLA是ARA的前體物），但ARA的護膚效果比GLA更好，ARA可以取代或部分取代GLA生產高檔護膚化妝品。ARA還具有營養毛囊、促進毛發再生的功能，可用于開發護發產品，預防和治療脫發。近年來，添加油脂作為能量飼料受到動物營養學家的推崇。ARA可提供動物體內所必需的PUFAs和高濃度、易利用的代謝能，其代謝能價值是碳水化合物和蛋白質的2.25倍。因此，對ARA的研究和開發將創造極高的經濟價值，有非常重要的意義。

發明內容

本發明提出了一種從發酵液中提取RAR的方法，該方法可提高微菌發酵生產中ARA的總提取率，降低生產成本，減少三廢量。

本發明技術方案包括：

一種從發酵液中提取二十碳四烯酸的方法，包括以下步驟：

a對發酵液依次進行一級脫水、二級脫水和三級脫水，得含水量在5%以下的菌粉；

b向上述菌粉中加入溶劑進行萃取，萃取溫度為45～60℃，連續萃取2～4次，浸提萃取菌粉中含有的油脂；

c將步驟b所得油脂通過真空濃縮脫除溶劑，真空度為0.4Kpa以下，脫除時間為1～5小時，得毛油；

d對上述毛油進行水洗、堿洗，得純化后的毛油；

e向上述純化后的毛油中加入活性白土進行脫色，所述活性白土的加入量為純化后毛油質量的1～5%，脫色的同時抽真空進行攪拌，脫色溫度75～85℃，脫色時間為20～40分鐘；

f接步驟e，過濾除去活性白土，對脫色后的毛油進行水蒸氣氣提除臭，溫度75～85℃，真空度小于0.4Kpa，脫臭0.5～1小時，然后維持真空狀態下緩慢冷卻，離心得成品二十碳四烯酸。

作為本發明的一個優選方案，上述步驟a中，一級脫水為絮凝沉淀法脫水，二級脫水為碟片式離心機離心脫水；三級脫水為冷凍干燥法脫水。

作為本發明的另一個優選方案，上述步驟b中，溶劑選用石油醚、乙醚、丁烷、己烷、丙酮、氯仿、乙醇、甲醇、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酸乙酯中的一種或幾種的混合物；所述溶劑的加入量為所述發酵液質量的40%～60%。

上述步驟d中，水洗、堿洗具體步驟為：在毛油中加入磷酸和NaCl溶液，溫度控制在55～65℃，緩慢攪拌、靜置0.5～1小時，取上層油液，水洗至中性；然后加入8%的NaOH溶液進行中和，攪拌40～50分鐘，完成中和反應后，繼續攪拌10～15分鐘，使皂粒絮凝；升溫到80～95℃，當皂粒明顯沉降時，停止攪拌，靜置沉降，分離皂腳，80～95℃水洗三次，真空干燥，得純化后的毛油。

上述中和反應中攪拌轉速為60～70r／min，完成中和反應后攪拌轉速為30～40r／min。

本發明所帶來的有益技術效果：

本發明提出了一種從發酵液中提取二十碳四烯酸的方法，首先將發酵液通過一級脫水、二級脫水和三級脫水，得到含水量在5%以下的菌粉；然后對所得菌粉進行萃取，浸提萃取菌粉中含有的油脂；對油脂進行真空除溶劑、水洗、堿洗等步驟，最后加入活性白土進行脫色，進行水蒸氣氣提除臭，冷卻得成品二十碳四烯酸。

本發明通過采用干燥、萃取、蒸餾、脫色、除臭、濃縮工藝等步驟提取ARA，其中萃取步驟可降低母液的產生量，減少ARA在母液中的含量，使ARA提取率大大提高，降低生產成本，減少三廢量；蒸餾步驟可使低沸點的萃取劑回收再利用；脫色與除臭步驟可進一步提高ARA成品的純度和品質。