[發(fā)明專利]重組集成干擾素變異體聚乙二醇偶聯(lián)物的制備和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410146151.8
• 申請(qǐng)日: 2010-10-25
• 公開（公告）號(hào): CN103933577A
• 公開（公告）日: 2014-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅華;范開;張繼蘭;李祥;張益
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京凱因科技股份有限公司;重慶富進(jìn)生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類號(hào): A61K47/48
• 分類號(hào): A61K47/48;A61K38/21;C07K14/56;C07K1/107;A61P31/20;A61P35/00
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)及制藥領(lǐng)域，特別是涉及一種重組集成干擾素變異體的聚乙二醇偶合物及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明是發(fā)明名稱為“抗病毒活性的人α干擾素衍生物”(專利號(hào)為ZL01102915.3)發(fā)明專利的延伸。

背景技術(shù)

早在1957年，lssacs等人發(fā)現(xiàn)病毒感染的細(xì)胞產(chǎn)生一種因子，可抵抗病毒的感染，干擾病毒的復(fù)制，因而命名為干擾素(interferon，IFN)。干擾素是由滅活的或活的病毒作用于易感細(xì)胞后，由易感細(xì)胞基因組編碼而產(chǎn)生的一組糖蛋白。其活性及抗原性皆取決于分子中的蛋白質(zhì)，而與其糖基無關(guān)。根據(jù)其來源和結(jié)構(gòu)，可將IEN分為IFN-α、IFN-β、IFN-γ，它們分別由白細(xì)胞、纖維母細(xì)胞和活化T細(xì)胞產(chǎn)生。IFN-α為多基因產(chǎn)物，有十余種不同亞型，但它們的生物活性基本相同。IFN除有抗病毒作用外，還有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、控制細(xì)胞增殖及引起發(fā)熱等作用。目前臨床上使用的干擾素大多是通過基因重組技術(shù)得到的。

IFN是慢性病毒性肝炎經(jīng)臨床驗(yàn)證有效的一線治療藥物。臨床使用較多的是天然結(jié)構(gòu)的IFNα-2a和IFNα-2b。二者均屬于短效干擾素，半衰期短(4～16h)，血清濃度在注射24h后已經(jīng)很低。其在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)過程影響了其抗病毒治療的遠(yuǎn)期療效。按照目前3～6MU/kg，每周3次的用藥方法，在體內(nèi)干擾素水平呈現(xiàn)出典型的“峰-谷曲線”。干擾素血清水平大幅度波動(dòng)容易使病毒水平反跳，產(chǎn)生耐藥性，降低治療效果。同時(shí)，短效干擾素存在毒副反應(yīng)大，人長期使用耐受性差，免疫原性強(qiáng)等不足。因此，對(duì)短效干擾素進(jìn)行修飾，延長其在體內(nèi)的半衰期，維持體內(nèi)血藥濃度的穩(wěn)定，將有助于提高其治療病毒性肝炎的有效性，并減輕毒副作用。

聚乙二醇(polyetnylene?glycol，PEG)是一種安全無毒、無活性的聚合物，常用于蛋白質(zhì)藥物修飾。修飾后的蛋白抗酶解、水溶性增加、半衰期延長、免疫原性和毒性降低(Inada，et?al.，J.Bioact.And?Compatible?Polymers，5：343(1990).Delgalo，et?al.，Critical?Reviews?in?Therapeutic?Drug?Carrier?systems，9：249(1992)kate，Advanced?Drug?Delivery?Systems，10：91(1993))?；舴蚵?拉羅齊公司的中國專利：ZL93116479.6和ZL97105433.9公開了聚乙二醇-干擾素結(jié)合物的制備，先靈公司的中國專利200580032850.2公開了穩(wěn)定的聚乙二醇化干擾素的制劑的制備。目前，已有兩種PEG修飾的人α干擾素(霍夫曼-拉羅齊的PEGASYS和先靈公司的PEGINTRON)用于慢性丙型和乙型肝炎的治療。兩者聚乙二醇化后腎臟清除率明顯降低，半衰期延長(30～16h)、免疫原性降低，每周僅需給藥1次。在清除HCV/HBV病毒方面明顯優(yōu)于短效干擾素。治療丙型肝炎HCV-RNA近期反應(yīng)率可達(dá)69％，持續(xù)反應(yīng)率達(dá)39％，而常規(guī)干擾素僅為7％。治療乙型肝炎HBeAg轉(zhuǎn)陰率可達(dá)37％，綜合應(yīng)答率(即HBeAg轉(zhuǎn)陰、HBV?DNA抑制和ALT正?；?為35％，61％的病人伴隨HBVDNA轉(zhuǎn)陰(＜400copies/mL)，7％出現(xiàn)了HBsAg轉(zhuǎn)陰。而常規(guī)干擾素治療乙肝后三項(xiàng)指標(biāo)僅為(15％、25％、12％)。無HBsAg轉(zhuǎn)陰的病人(ReddyKR，etal.Hepatology，2001，33：433-438.Jessner?W，et?al.J?Viral?Hepat.2003，10：37-42.Shiffman?ML，et?al.Hepatology，2004；40(4，suppl1)：314A.Davis?GL，et?al.Hepatology，2003；38：645-52.Janssen?HL，et?al.Lancet，2005；365：123-129.Cooksley?WG?et?al..J?Viral?Hepat，2003；10：298-305.)。