[發明專利]一種人血白蛋白的生產方法

有效

• 申請號: 201410146102.4
• 申請日: 2014-04-12
• 公開（公告）號: CN104004084B
• 公開（公告）日: 2016-10-26
• 發明（設計）人: 沈榮杰;湯浩宇;萬天金;莊建芬;胡云剛
• 申請（專利權）人: 浙江海康生物制品有限責任公司
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;C07K1/34
• 代理公司: 北京維正專利代理有限公司 11508
• 代理人: 楊春女

1.一種人血白蛋白的生產方法，主要包括血漿的合并與融化、組分I的制作與離心、組分II+III的制作和壓濾、組分IV的制作和壓濾、組分V的制作和壓濾、組分V沉淀溶解過濾、超濾透析濃縮、配制、巴氏滅活、除菌灌裝、孵放、檢定的步驟，其特征是：所述超濾透析濃縮的步驟中調節pH值至5.5~6.0，調節氯化鈉濃度至1.5~2.0%。

2.根據權利要求1所述的人血白蛋白的生產方法，其特征是：所述超濾透析濃縮過程中采用連續等倍透析法與梯度升溫法相結合進行操作。

3.根據權利要求2所述的人血白蛋白的生產方法，其特征是所述血漿的合并與融化、組分I的制作與離心、組分II+III的制作和壓濾、組分IV的制作和壓濾、組分V的制作和壓濾、組分V沉淀溶解過濾、超濾透析濃縮、配制、巴氏滅活、除菌灌裝、孵放、檢定的步驟具體為：

（1）、血漿的合并與融化，將溫度低于-5℃的血漿制于解凍罐內，罐體夾層內通37℃以下的溫水，融化過程中保持血漿溫度全程不超過4℃，反應得到融化的混合血漿；

（2）、組分I的制作與離心，調節混合血漿pH值到7.00~7.40，并保持混合血漿溫度-2.5~-3.5℃，加入乙醇并調節乙醇濃度至8%（V/V），調節離子強度至0.15，之后對其進行離心，保持離心全程混合血漿溫度保持在-2.5~-3.5℃，得到組分I沉淀和組分I上清液；

（3）、組分II+III的制作和壓濾，取組分I上清液，調節pH值至6.85~6.95，保持組分I上清液溫度-4.5~-5.5℃，加入乙醇并調節乙醇濃度至20%（V/V），調節離子強度至0.14，得到組分II+III反應液；取組分II+III反應液按28g/L血漿的量添加硅藻土并攪拌30分鐘以上，之后對組分II+III反應液進行壓濾，壓濾過程中保持過濾壓力小于等于2.0Kg/cm²,得到組分II+III沉淀和組分II+III上清液；

（4）、組分IV的制作和壓濾，取組分II+III上清液連續進行組分IV-1和IV-4制作，按照108.1ml/L的比例加入冷注射用水，調節pH值至5.10~5.20，保持組分II+III上清液溫度為-4.5~-5.5℃，加入乙醇并調節乙醇濃度至18%（V/V），調節離子強度至0.13，靜至6小時以上，使組分II+III上清液中產生組分IV-1沉淀；調節pH值至5.95~6.05溫度為-4.5~-5.5℃，加入乙醇并調節乙醇濃度至40%（V/V），調節離子強度至0.10，靜至8小時以上，之后繼續向組分II+III上清液中按21g/L血漿的量添加硅藻土，攪拌30分鐘以上對其進行壓濾，壓濾過程中保持過濾壓力小于等于2.0Kg/cm²，得到組分IV上清液和組分IV-1沉淀與組分IV-4沉淀混合形成的組分IV沉淀；

（5）、組分V的制作和壓濾，取組分IV上清液，調節pH值至4.75~4.85，保持組分IV上清液溫度為-9~-11℃，加入乙醇并調節乙醇濃度至40%(V/V)，調節離子強度至0.09，靜制3小時以上；之后進行壓濾，壓濾過程中保持過濾壓力小于等于2.0Kg/cm²，得到組分V上清液和組分V沉淀；

（6）、組分V沉淀溶解過濾，取組分V沉淀加4~5倍沉淀量的注射用水進行溶解，溶解過程中保持溫度為1~3℃，之后對反應液進行澄清過濾，得到組分V溶解過濾液；

（7）、超濾透析濃縮，超濾透析濃縮過程中調節pH值至5.5~6.0，調節氯化鈉濃度至1.5~2%，并連續進行8次透析，其每次透析的組分V溶解液溫度依次為2℃、3℃、5℃、9℃、17℃、25℃、25℃、25℃、25℃、25℃，其每次透析的透析水體積為等倍的組分V濃縮液體積，得到人血白蛋白原液；

（8）、配制、巴氏滅活、除菌灌裝、孵放、檢定，取人血白蛋白原液加入注射用水調節蛋白含量19.5~20.5%，加入辛酸鈉并調節辛酸鈉含量至0.140~0.180mmol/L，加入氯化鈉調節鈉離子含量至130~160mmol/L,調節pH值至6.6~7.0，之后對人血白蛋白原液進行巴氏滅活，巴氏滅活過程中保持人血白蛋白原液溫度為60±0.5℃持續10小時，之后進行過濾除菌，得到人血白蛋白半成品；然后對人血白蛋白半成品進行無菌灌裝和孵放，孵放過程保持溫度30~32℃，至少孵放14天，最后對產品進行二次燈檢，合格品即為人血白蛋白成品；最后將人血白蛋白成品包裝入庫。