[發明專利]一種提取制備苯甲酰芍藥苷和苯甲酰芍藥內酯苷的方法

有效

• 申請號: 201410144187.2
• 申請日: 2014-04-11
• 公開（公告）號: CN103951717A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 楚楚;李行諾;顏繼忠;章詩迪;宋敏
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/08
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王曉普

1.一種提取制備苯甲酰芍藥苷和苯甲酰芍藥內酯苷的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：

（1）選取含苯甲酰芍藥苷和苯甲酰芍藥內酯苷的植物藥材，粉碎后采用醇水混合溶劑進行提取，提取液合并、濃縮、干燥，得粗提物；

（2）步驟（1）所得粗提物加入填充有大孔吸附樹脂的色譜柱中，用水和乙醇的混合溶劑為洗脫劑進行梯度洗脫，所述梯度洗脫程序為：純水、30%體積濃度乙醇水溶液、50%體積濃度乙醇水溶液、95%體積濃度乙醇水溶液，收集50%和95%體積濃度乙醇水溶液兩部分洗脫部位的洗脫液，濃縮，干燥，得大孔樹脂富集物；

（3）由步驟（2）所得大孔樹脂富集物，進行高速逆流色譜分離，以體積比0.5-2:5:1-3:3-5正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水為溶劑體系，混合充分后靜置，按上下兩相分開，上相作為固定相，下相作為流動相，將固定相充滿高速逆流色譜儀的多層線圈分離柱，設定高速逆流色譜儀，在500～1000r/min轉速下，以0.5～5ml/min流速注入流動相，以波長190-380nm的紫外檢測器檢測，當明顯有流動相流出時，取大孔樹脂富集物，用上相、下相體積比1：1的混合溶劑溶解后進樣，根據紫外檢測器光譜圖的峰形，定時收集流出液，經HPLC檢測，合并相同成分的流出液，濃縮、干燥，分別制得苯甲酰芍藥苷和苯甲酰芍藥內酯苷。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟（1）中，所述含苯甲酰芍藥苷和苯甲酰芍藥內酯苷的植物藥材為毛茛科芍藥屬植物。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟（1）中，所述含苯甲酰芍藥苷和苯甲酰芍藥內酯苷的植物藥材為白芍或赤芍。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟（1）中，所述醇水混合溶劑為體積濃度30%-90%乙醇；所述的提取方式為煎煮、回流、超聲、冷浸、滲漉、微波或高壓提取，提取次數為2～3次，每次提取的時間為0.5-3小時。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟（1）按以下工藝進行：白芍或赤芍藥材、粉碎成粗粉后加體積濃度30%-90%乙醇，超聲提取2-3次，每次0.5-3小時，提取液合并、旋轉蒸發至無醇味，冷凍干燥，得粗提物；每次提取所用的體積濃度30%-90%乙醇的體積用量以粗粉的質量計為5～15L/kg。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟（2）中，所述大孔吸附樹脂為非極性、弱極性或中極性的大孔吸附樹脂。

7.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟（2）中，所述大孔吸附樹脂為D101或AB-8大孔吸附樹脂。

8.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟（2）按以下工藝進行：步驟（1）所得粗提物加入填充有D101或AB-8樹脂的色譜柱中，用水和乙醇的混合溶劑為洗脫劑進行梯度洗脫，所述梯度洗脫程序為：先用2-6倍柱體積的純水洗脫、再用2-6倍柱體積的30%體積濃度乙醇水溶液洗脫、再用2-6倍柱體積的50%體積濃度乙醇水溶液洗脫、最后用2-6倍柱體積的95%體積濃度乙醇水溶液洗脫，收集50%和95%體積濃度乙醇水溶液兩部分洗脫部位的洗脫液，濃縮，干燥，得大孔樹脂富集物；洗脫流速為0.1-2ml/min。

9.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟（3）中，所述正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水的體積比為0.5:5:2:4或0.5:5:1:5。

10.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟（3）按以下工藝進行：由步驟（2）所得大孔樹脂富集物，進行高速逆流色譜分離，以體積比0.5:5:2:4或0.5:5:1:5正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水為溶劑體系，混合充分后靜置，按上下兩相分開，上相作為固定相，下相作為流動相，將固定相充滿高速逆流色譜儀的多層線圈分離柱，設定高速逆流色譜儀，在950r/min轉速下，以1.5ml/min的流速注入流動相，以波長254nm的紫外檢測器檢測，當明顯有流動相流出時，取大孔樹脂富集物，用上相、下相體積比1：1的混合溶劑溶解后進樣，根據紫外檢測器光譜圖的峰形，定時收集流出液，經HPLC檢測，合并相同成分的流出液，濃縮、干燥，分別制得苯甲酰芍藥苷和苯甲酰芍藥內酯苷。