[發(fā)明專利]以幼花為外植體的虎眼萬(wàn)年青離體快繁方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410143770.1
• 申請(qǐng)日: 2014-04-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103931498A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 崔金騰;張克中;李月華;王杰;田娜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京農(nóng)學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.以幼花為外植體的虎眼萬(wàn)年青離體快繁方法，其特征在于包括下列步驟：

1)外植體接種及愈傷組織誘導(dǎo)：將幼花序花苞從子房下端剪開(kāi)取下，將完整的花苞放入無(wú)菌超凈臺(tái)中，用75％(體積/體積)酒精浸泡60～90秒，用0.1～0.2％(質(zhì)量/體積)的升汞溶液浸泡8～10分鐘，無(wú)菌水沖洗3～5遍。將花苞從子房上部切開(kāi)，然后將花苞上部大部分切掉，剩余部分縱切一刀或兩刀，接種在含6-BA1.5～2.0mg/L、NAA0.1～0.2mg/L、蔗糖3.0～4.5％(質(zhì)量/體積)，pH值為5.5～6.5的MS培養(yǎng)基上，20℃～30℃每天日光燈照射4～6小時(shí)，光照強(qiáng)度1500～2000Lux。25～35天繼代一次，待長(zhǎng)出黃綠色愈傷時(shí)即便可誘導(dǎo)分化；

2)不定芽的誘導(dǎo)：將黃綠色的愈傷轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基：MS+6-BA(1～1.5mg/L)+2，4-D(1～2mg/L)+3.5～4.5％蔗糖(質(zhì)量/體積)，pH值為5.5～6.5，40～50天繼代一次，20℃～30℃每天日光燈光照8～10小時(shí)，光照強(qiáng)度1500～2000Lux。該愈傷分化能力可持續(xù)一年以上，從一塊愈傷經(jīng)反復(fù)繼代可分化出500株左右的再生苗；

3)根的誘導(dǎo)：再生植物轉(zhuǎn)到1/2MS+NAA(0.5～2mg/L)+蔗糖2％(質(zhì)量/體積)，pH值為5.5～6.5的生根培養(yǎng)基上，20℃～30℃每天日光燈光照12～14小時(shí)，光照強(qiáng)度1500～2000Lux；

4)再生植株移栽：植株生根后即可移栽，移栽至草炭：蛭石：細(xì)沙＝3∶1∶1的種植基質(zhì)中，移栽前將植株上的瓊脂等雜物沖洗干凈，種植基質(zhì)121℃滅菌30～45分鐘，10～15天澆一次透水便可成活。