[發明專利]一種檢測肉牛A-FABP基因單核苷酸多態性的方法有效
| 申請號： | 201410142764.4 | 申請日： | 2014-04-11 |
| 公開（公告）號： | CN103911450A | 公開（公告）日： | 2014-07-09 |
| 發明（設計）人： | 甘乾福;喬慧;梁學武;陳佳欽 | 申請（專利權）人： | 福建農林大學 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 福州元創專利商標代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡學俊 |
| 地址： | 350002 福*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 檢測 肉牛 fabp 基因 核苷酸 多態性 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種用于檢測肉牛A-FABP基因單核苷酸多態性的引物，其特征在于：所述的引物對P1為：正向引物F:5'-AGGCGTGGGCTTTGCTAC-3'；反向引物R:5'-GAATGGCTTTCCTCCTTCTACA-3'。
2.一種檢測肉牛A-FABP基因單核苷酸多態性的方法，其特征在于：包括以下步驟：
⑴?以包含A-FABP基因的待測牛基因組DNA為模版，以引物對P1為引物，PCR擴增牛A-FABP基因；
⑵?對步驟⑴的擴增產物進行PCR目的片段檢測；
⑶?對步驟⑵的目的片段進行PCR-SSCP檢測：首先對目的片段分別用變性劑進行變性處理，然后根據聚丙烯酰胺凝膠電泳結果判定其多態性位點。
3.根據權利要求2所述的一種檢測肉牛A-FABP基因單核苷酸多態性的方法，其特征在于：所述多態性位點包括：在牛的A-FABP基因第2989位為A或G的堿基多態性位點，表現為AA、AG、GG三種基因型。
4.根據權利要求2所述的檢測牛A-FABP基因單核苷酸多態性位點的方法，其特征在于，所述的PCR擴增反應程序為：94℃預變性5min；94℃變性30s；60℃退火40s；72℃延伸30s；72℃延伸7min；4℃保存。
5.根據權利要求2所述的檢測牛A-FABP基因單核苷酸多態性位點的方法，其特征在于，所述的聚丙烯酰胺凝膠電泳采用10%的聚丙烯酰胺凝膠。
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