[發明專利]半乳糖凝集素-3C（Galectin-3C) 抗體融合蛋白的制備方法和用途

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• 申請號: 201410139547.X
• 申請日: 2014-04-08
• 公開（公告）號: CN103880963A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: 包建新;余躍飛;樓亞平
• 申請（專利權）人: 江蘇匡亞生物醫藥科技有限公司;廣州恒泰生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;A61K38/17;A61K47/48;A61P35/00
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1.一種半乳糖凝集素-3C（Galectin-3C)?與抗體連接的新型融合蛋白，其特征在于:?蛋白Galectin-3C?經由一個或多個氨基酸組成的接頭肽（L）連接到抗體重鏈恒定區的片段，其中Galectin-3C、接頭肽（L）和抗體重鏈恒定區的片段利用肽鍵以從N末端到C末端的順序連接。

2.根據權利要求1所述的Galectin-3C抗體融合蛋白，其特征在于：所述Galectin-3C是Galectin-3?N端截斷的多肽，或由在所述氨基酸序列中的任何一個或幾個氨基酸被刪除、取代和/或添加的氨基酸序列組成，含有糖基結合位點。

3.根據權利要求1所述的Galectin-3C抗體融合蛋白，其特征在于：所述抗體重鏈恒定區為重鏈恒定區全部（CH1-鉸鏈區-CH2-CH3）或重鏈恒定區Fc片段（鉸鏈區-CH2-CH3）或其一部分，或其組合。

4.根據權利要求1所述的Galectin-3C抗體融合蛋白，其特征在于：所述抗體重鏈恒定區為人抗體IgG重鏈恒定區，或IgG亞型重鏈恒定區的部分或組合。

5.根據權利要求1所述的Galectin-3C抗體融合蛋白，其特征在于：所述接頭肽（L）含有由式(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser)_n（式中n是1~8的整數）或者由式Pro-(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser)_n（式中n是1~8的整數）表示的氨基酸序列。

6.根據權利要求5所述的Galectin-3C抗體融合蛋白，其特征在于：所述接頭肽（L）含有由式(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser)_n（式中n是1~4的整數）或者由式Pro-(Gly-Gly-Gly-Gly-Ser)_n（式中n是1~4的整數）表示的氨基酸序列。

7.一種權利要求1～6任一項所述的Galectin-3C抗體融合蛋白的制備方法，其特征在于，包括以下步驟:

①合成編碼所述融合蛋白的cDNA?序列；

②將cDNA?序列插入工具載體，構建可在宿主細胞中表達的表達載體；

③將所述的表達載體在宿主細胞中表達；

④分離純化表達的融合蛋白。

8.根據權利要求7所述的Galectin-3C抗體融合蛋白的制備方法，其特征在于：所述的步驟②中的工具載體為市售商業化載體或自行構建的可供表達的載體。

9.根據權利要求7所述的Galectin-3C抗體融合蛋白的制備方法，其特征在于：所述的步驟②和步驟③中的宿主細胞為如大腸桿菌、酵母、哺乳動物細胞、植物細胞、昆蟲細胞等常見表達宿主。

10.一種權利要求1～6任一項所述的Galectin-3C抗體融合蛋白，其特征在于：用于制備治療人類肺癌等癌癥的藥品。