[發明專利]腫瘤靶向多肽?阿霉素衍生物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201410137337.7
• 申請日: 2014-04-04
• 公開（公告）號: CN103908677B
• 公開（公告）日: 2017-02-01
• 發明（設計）人: 陳蕓;徐金慧;盛媛;許飛飛;方丹君;尤一雯
• 申請（專利權）人: 南京醫科大學
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;A61K31/704;A61P35/00
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司32200
• 代理人: 李紀昌,唐循文

技術領域

本發明屬于生物與醫藥技術領域，具體涉及一種具有抗癌活性的多肽—阿霉素衍生物及其制備方法和應用。?

背景技術

阿霉素（DOX）屬蒽環類化合物，是最有效的抗癌藥物之一，在臨床上被廣泛用于治療急性白血病、乳腺癌、淋巴瘤以及各種實體瘤。但與其它抗癌藥物一樣，由于其易產生耐藥性，選擇性差，阿霉素的臨床應用受到嚴重的限制。在近20年中，人們針對阿霉素進行了大量的結構改造和修飾，以期增強腫瘤靶向性，提高療效。?

抗癌藥物的耐藥性和低選擇性，可以通過以各種多肽或蛋白作為攜帶載體，利用載體所具有的受體介導的內吞機制，增加其對癌細胞直接的靶向性來獲得改善。上述結合物的選擇性既可以通過癌細胞膜上存在的可以被特異性片段識別的受體，也可由癌細胞膜上具有比正常細胞更高水平的受體來獲得。文獻報道，轉鐵蛋白受體在腫瘤細胞表面的表達水平遠高于正常細胞，因此，我們選擇轉鐵蛋白受體為我們特征性的受體。目前，轉鐵蛋白受體的配體，轉鐵蛋白作為頭基廣泛用于構建腫瘤靶向給藥系統。但是機體的內源性轉鐵蛋白濃度高，競爭抑制轉鐵蛋白修飾的給藥系統的靶向轉運。近年通過噬菌體展示技術篩選出的T7肽（HAIYPRH）和T12肽（THRPPMWSPVWP），可靶向結合轉鐵蛋白受體，且對轉鐵蛋白受體的親和性和轉鐵蛋白相當。而二者在轉鐵蛋白受體上的結合位點與轉鐵蛋白不同，不會與內源性的轉鐵蛋白產生競爭抑制，且不影響轉鐵蛋白本身的生理功能，相反轉鐵蛋白與受體的結合會促進T7肽和T12肽的入胞效率。同時，它們都是小分子多肽，具有可化學合成、穩定性好的優點，作為靶向頭基空間位阻小，臨床應用前景好。?

經結構修飾的藥物到達腫瘤部位后，能否以活性形式有效釋放出來，關系到藥物能否進入靶向部位發揮藥效，是藥物設計的又一關鍵問題。腫瘤細胞的旺盛生長伴隨著大量酸性代謝產物的形成和外排，從而形成腫瘤酸性微環境。研究發現，腙鍵在酸性條件下選擇性斷開，而在正常生理環境中保持穩定。近年來，阿霉素的腙衍生物，例如（6-馬來酰亞胺基己酰基）腙衍生物（DOXO-EMCH），作為共價鍵連接體，構建靶向給藥系統，引起了廣泛的關注。?

發明內容

解決的技術問題：?

本發明的目的是提供一種腫瘤靶向多肽—阿霉素衍生物及其制備方法和應用。?

技術方案：?

腫瘤靶向多肽—阿霉素衍生物，結構通式如式I所示：?

其中R為T10肽：HAIYPRHGGC或T15肽：THRPPMWSPVWPGGC。?

上述腫瘤靶向多肽—阿霉素衍生物的制備方法，包括以下步驟：步驟1，將多肽溶于pH值7.8～8.2的磷酸鹽緩沖液里，再將阿霉素前體藥物（6-馬來酰亞胺基己酰基）腙衍生物（DOXO-EMCH）溶于溶劑中得到溶液，所述多肽為T10肽或T15肽，所述溶劑為水與N，N’—二甲基甲酰胺的混合物，將DOXO-EMCH溶液滴加入到多肽溶液中，室溫下避光攪拌反應，再將溶液離心去除沉淀，即可制得粗產物；步驟2，采用制備色譜法對粗產物進行分離純化，離心濃縮，制得精制品T10-DOXO-EMCH或T15-DOXO-EMCH。?

所述步驟1中，DOXO-EMCH溶于的溶劑為水與N，N’—二甲基甲酰胺的1:1體積比混合物。?

所述步驟1中，DOXO-EMCH與多肽摩爾比為2:1。?

所述步驟1中，DOXO-EMCH滴加入到多肽溶液中的速率為25μL/min。?

所述步驟1中，避光室溫攪拌時間為1.5h。?

所述步驟2中，制備色譜法的色譜條件為：制備柱SanFire?Prep?C18OBD柱：18mm×150mm，10μm；流動相A為甲酸水溶液，其中甲酸體積百分比濃度為0.01%，流動相B為100%乙腈；梯度洗脫分離目標產物。T10‐DOXO‐EMCH的洗脫程序是：0～5min，5～20%B，5～15min，20%～50%B，15～20min，50%～80%B，20～25min，80%～20%B，25～30min，20%～5%B，T15‐DOXO‐EMCH的洗脫程序是：0～5min，10%～20%B，5～15min，20%～20%B，15～20min，20%～50%B，20～25min，50%～90%B，25～30min，90%～10%B。?

上述腫瘤靶向多肽—阿霉素衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應用。?

抗腫瘤藥物，有效成分為權利要求1式I所示的腫瘤靶向多肽—阿霉素衍生物。?

上述腫瘤靶向多肽—阿霉素衍生物在抗腫瘤中的應用。?

有益效果：?