[發(fā)明專利]梅嶺霉素合成基因簇中酮還原酶MeiF在手性芳香醇生產(chǎn)中的應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410130983.0 | 申請日: | 2014-04-02 |
| 公開(公告)號(hào): | CN104975048B | 公開(公告)日: | 2018-07-24 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 鄭艦艇;季俊杰 | 申請(專利權(quán))人: | 中國科學(xué)院過程工程研究所 |
| 主分類號(hào): | C12P7/22 | 分類號(hào): | C12P7/22;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 100190 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 霉素 合成 基因 簇中酮 還原酶 meif 手性 芳香 生產(chǎn) 中的 應(yīng)用 | ||
1.酮還原酶MeiF以芳香酮為底物生物制備手性芳香醇的方法,其特征在于所述的方法包括:酮還原酶MeiF作為催化劑,以芳香酮為底物,以葡萄糖作為輔底物,以葡萄糖脫氫酶GDH和NADP+提供NADPH生物還原制備芳香手性醇;所述的酮還原酶MeiF的制備方法為將含有meiF基因的表達(dá)載體pET28a+meiF導(dǎo)入大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)并利用鎳柱進(jìn)行純化,所述的酮還原酶MeiF的基因序列為:Atgacccaaacagctggaaaaaccgcactggtgaccggtgcggcgcggccatcgcccgaaggctcgccgccgaaggtgttctggtggccgtgcactacgggcggtgcaaagcggacgcggaggaaacggtcgcgtcgatcgagcaggccggcgggcaggcattcgccatcagggcggaccttgcggccgacgacgccctcgacacgctcttcagcgagctcgcgaccgggctcgccggccggccgctgaacatcctggtgaacaacgccgccatctacgccgacccggacgacccggccgccgcgcaggcggacggctatgtggcgggcatttccgaggtcactcaggaggagttcgaccgtatcttcagcgtcaatgtacgtgccccgtttttcgtcacccaacggtgtctgccgctcctcgccgacggcggacggatcgtcaacatctcttccgccgtcaccaggatcgcctggccgctgctgccctacgccatgagcaagggcgccctcgagatcatggcgcccaggctggccaatgagctgggacaccggggaatcaccgtcaacaccatcgcgccgggcatcaccgacaacaccaaaaccaacacgtggctgcacgatatgcccggggcggccgagggcgtggccgccatgaccgcactgcgccgactcggtcagccgtccgacatcgccgatgtcgtcgccctcctcgcctcggacgaggcccgctgggtcaccggacaactggtcgacgcctccggcggcatggccctggcccccacaccaccgggcatgtag;所述的酮還原酶MeiF以芳香酮為底物生物制備手性芳香醇的方法的反應(yīng)體系為底物芳香酮0.5mM;Trisbuffer 50mM,其中Tris buffer的pH值為7.5;NaCl 100mM;10%甘油;NADP+100μM;D-葡萄糖200mM;GDH 5μM;酮還原酶MeiF 20μM;水,22度,140rpm反應(yīng)20小時(shí)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酮還原酶MeiF以芳香酮為底物生物制備手性芳香醇的方法,其特征在于所述的芳香酮類化合物的結(jié)構(gòu)式為
其中,R1為鹵素,CN,H,烷基,苯基或帶有取代基的苯基;R2為羥基烷基,羧基,苯基或帶有取代基的苯基。
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