[發(fā)明專利]抗VEGF/PIGF雙特異性抗體、其制備方法及用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410128464.0
• 申請日: 2014-04-01
• 公開（公告）號(hào): CN104974259B
• 公開（公告）日: 2019-06-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周遠(yuǎn)鋒;張成海;張玉晶
• 申請（專利權(quán)）人: 三生國健藥業(yè)（上海）股份有限公司
• 主分類號(hào): C07K16/46
• 分類號(hào): C07K16/46;C07K16/22;C12N15/13;C12N15/85;C12N5/10;C12P21/02;A61K39/395;A61P35/00
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，更具體的，本發(fā)明公開了抗VEGF/PIGF雙特異性抗體、其制備方法及用途。本發(fā)明的抗VEGF/PIGF雙特異性抗體既能與VEGF結(jié)合，又能與PIGF相結(jié)合，可有效抑制腫瘤內(nèi)血管形成，進(jìn)而更有效地抑制腫瘤生長。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，本發(fā)明公開了一種能同時(shí)與兩種不同靶點(diǎn)相結(jié)合的雙特異性抗體、其制備方法及其在腫瘤治療中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

新生血管生成在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著十分重要的作用。當(dāng)腫瘤的體積超過1mm³時(shí)，依靠組織滲透所獲得的營養(yǎng)不能夠支撐腫瘤繼續(xù)發(fā)展對于營養(yǎng)的需求。因此，腫瘤組織需要通過新生血管的生成來獲取其發(fā)展所需要的各種養(yǎng)分。處于缺氧以及營養(yǎng)缺乏狀態(tài)的腫瘤細(xì)胞會(huì)分泌多種促新生血管生成的因子，如血管內(nèi)皮生長因子（VEGF），成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)，人胎盤生長因子（PIGF)，腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等。在這些生長因子的作用下，通過一系列復(fù)雜的過程，包括血管內(nèi)皮基質(zhì)的降解、內(nèi)皮細(xì)胞的遷移、內(nèi)皮細(xì)胞增殖、管道化分支形成血管環(huán)和新的基底膜等步驟來形成新的血管。由于新生血管生成在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的重要性，通過抑制腫瘤的新生血管生成來抑制腫瘤的生長已經(jīng)成為當(dāng)今腫瘤臨床治療的重要手段。

在腫瘤細(xì)胞分泌的各種促新生血管生成的生長因子中，VEGF是公認(rèn)的針對內(nèi)皮細(xì)胞特異性最高，促血管生長作用最強(qiáng)的有絲分裂原。VEGF與血管內(nèi)皮細(xì)胞上的兩種高親和力受體VEGFR1和VEGFR2結(jié)合后，直接刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，并誘導(dǎo)其遷移和形成管腔樣結(jié)構(gòu)；同時(shí)還可增加微血管通透性，引起血漿蛋白（主要是纖維蛋白原）外滲，并通過誘導(dǎo)間質(zhì)產(chǎn)生而促進(jìn)體內(nèi)新生血管生成。VEGF在血管發(fā)生和形成過程中起著中樞性的調(diào)控作用，是關(guān)鍵的新生血管生成刺激因子。

目前，Genetech公司開發(fā)的針對VEGF的特異性單克隆抗體Bevacizumab（Avastin）在臨床治療中已經(jīng)取得積極效果，被美國FDA批準(zhǔn)其與化療藥物聯(lián)合用于轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌、肺癌以及神經(jīng)膠質(zhì)瘤等腫瘤疾病的治療。但是由于腫瘤細(xì)胞所分泌的促血管新生因子的多樣性，以及相關(guān)的各種因子在功能上具有一定的可替代性，因此通過抑制單個(gè)促血管新生因子如VEGF的活性并不能完全阻斷腫瘤內(nèi)的新生血管的生成。臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，腫瘤組織在經(jīng)過Bevacizumab處理后，組織內(nèi)的其他促血管新生因子如PIGF，血管生成素-1（angiopoietin-1），F(xiàn)GF的表達(dá)量顯著上升,（Casanovas O,Hicklin DJ,Bergers G,Hanahan D.Drug resistance by evasion of antiangiogenic targeting of VEGFsignaling in late-stage pancreatic islet tumors.Cancer Cell2005;8:299-309.）。此外，臨床試驗(yàn)也進(jìn)一步證明，在結(jié)腸癌患者中，經(jīng)過抗VEGF的治療后，患者體內(nèi)的PIGF水平顯著升高（Willett CG,Boucher Y,Duda DG,di Tomaso E,Munn LL,et al.Surrogatemarkers for antiangiogenic therapy and dose-limiting toxicities forbevacizumab with radiation and chemotherapy:continued experience of phase Itrial in rectal cancer patients.J Clin Oncol2005;23:8136-9）。