[發明專利]一種高表達脂肽類生物表面活性劑的工程菌及其應用

有效

• 申請號: 201410124438.0
• 申請日: 2014-03-28
• 公開（公告）號: CN103898038B
• 公開（公告）日: 2016-10-26
• 發明（設計）人: 于慧敏;李煦;楊歡;李雪;沈忠耀
• 申請（專利權）人: 清華大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12P21/02;C12R1/125;C12R1/085;C12R1/38
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 陳波

1.一種高表達脂肽類生物表面活性劑的工程菌，其是將脂肽載體蛋白YcxA基因轉化至原始菌株構建而成，其過表達脂肽載體蛋白YcxA。

2.根據權利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述脂肽類生物表面活性劑為表面活性素。

3.根據權利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述原始菌株為具有產脂肽類生物表面活性劑能力的野生菌及其誘變株、突變株或基因工程改造菌株。

4.根據權利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述原始菌株為枯草芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌或假單胞菌。

5.根據權利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述原始菌株為枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）THY-7，保藏號為CGMCC?No.8906。

6.根據權利要求1所述的工程菌，其特征在于，其分類屬枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）TS589，保藏號為CGMCC?No.8907，其是將脂肽載體蛋白YcxA基因轉化至原始菌株構建而成，所述原始菌株為枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）THY-7，保藏號為CGMCC?No.8906。

7.權利要求1-6所述的工程菌在制備脂肽類生物表面活性劑中的應用。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，利用采用權利要求1-6所述工程菌生產脂肽類生物表面活性劑，步驟如下：

1）將工程菌接入LB液體培養基中，在35-40℃、搖床轉速為150-250rpm/min的條件下培養10-20小時，得到工程菌菌液；

2）按照1-20%的體積百分比將步驟1得到的工程菌菌液接入發酵培養基中，在35-40℃、搖床轉速為150-250rpm/min的條件下培養20-40小時，得到含有脂肽的發酵液；所述發酵培養基的組成為：糖類30-100g/L，無機氮源10-50g/L，有機氮源0.5-3g/L，KH₂PO₄0.1-1g/L，Na₂HPO₄·12H₂O0.5-3g/L，MgSO₄·7H₂O0.05-0.3g/L，CaCl₂0.002-0.01g/L，MnSO₄·H₂O0.002-0.01g/L，FeSO₄·7H₂O0.002-0.01g/L，pH6.5-7.5。

9.權利要求8所述的方法，其特征在于，所述糖類為葡萄糖、蔗糖、果糖、麥芽糖、淀粉或淀粉水解液。

10.權利要求8所述的方法，其特征在于，所述無機氮源為硫酸銨、氯化銨、硝酸銨、硝酸鈉或硝酸鉀；所述有機氮源為蛋白胨、酵母膏、牛肉膏或大豆粉。