[發明專利]一種用于鹽酸奈必洛爾合成質量控制的檢測分析方法

有效

• 申請號: 201410123241.5
• 申請日: 2014-03-28
• 公開（公告）號: CN103869022A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 張俊波;王躍;張站斌;卜昕;王學斌;唐志剛;關淑貞
• 申請（專利權）人: 北京師范大學;北京師宏藥物研制中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京華夏博通專利事務所(普通合伙) 11264
• 代理人: 劉俊

所屬技術領域

本發明涉及化合物合成質量控制檢測及藥物分析技術領域，具體說是涉及到一種用于鹽酸奈必洛爾合成質量控制的檢測分析方法。?

背景技術

鹽酸奈必洛爾是一種強效、選擇性的第三代β受體阻滯劑，可用于治療輕至中度高血壓病的藥物，其亦可用于治療心絞痛和充血性心力衰竭。相較于同類產品比索洛爾、阿替洛爾、普萘洛爾，其具有更高的選擇性，且不會引起支氣管平滑肌和血管平滑肌收縮，無內源性擬交感活性。可以預見，隨著心腦血管藥物市場份額的逐年增大，作為第三代高效治療心腦血管藥物的奈必洛爾，其需求也將逐年加大，本品由Johnson&Johnson公司開發，首先于1997年在德國、荷蘭上市，后又在意大利、英國、保加利亞、俄羅斯、日本、阿根廷、比利時、盧森堡、泰國等陸續上市。2007年美國FDA批準上市。?

鹽酸奈必洛爾的合成方法有多種，其中以楊森公司的申報路線最成熟、最早適于用工業化的路線，其反應式如下：?

在本路線中，以6-氟-色滿-2-羧酸(1)為起始原料，經還原反應成醇，再經氧化反應成醛，醛再經環氧化反應成相應的環氧化物(2)和(2')，再與芐胺反應生成N-芐基奈必洛爾(4)，最后?通過脫芐基及鹽酸化得到最終產物鹽酸奈必洛爾。在本路線中起始原料與關鍵中間體(2及2'，3，4)需要進行質量控制；最終產物鹽酸奈必洛爾為(S,R,R,R)與(R,S,S,S)的外消旋混合物，也需要對其進行有關物質、異構體雜質及含量的測定。目前關于奈必洛爾質量控制的高效液相色譜(HPLC)分析方法不僅還未收入美國藥典(USP)及歐盟藥典(EP)，而且在國內外文獻及專利的調研中也未見對鹽酸奈必洛爾合成中的關鍵中間體進行質量控制的方法，特別是對鹽酸奈必洛爾中的有關物質進行檢測的HPLC方法非常重要，但是目前為止還未見報道。而全面系統地從起始原料到最終產物中及其合成中的關鍵中間體進行質量控制，對于鹽酸奈必洛爾的質量研究及合成工藝控制具有相當重要的指導意義，也是本領域當前面臨的重要任務。?

發明內容

本發明的目的是建立一種用于鹽酸奈必洛爾合成質量控制的檢測分析方法，方法具有分離度好、簡單快速、專屬性強、靈敏度高，能夠對鹽酸奈必洛爾合成過程中的原料、關鍵中間體和終產品進行質量控制，保證整個合成過程的可控性。?

為了達到上述目的，本發明采用高效液相色譜法(HPLC)：一種用于鹽酸奈必洛爾合成質量控制的檢測分析方法，包括了起始原料1(6-氟-色滿-2-羧酸)的純度檢測、中間體2，2'(環氧化物)化學純度檢測、中間體2，2'(環氧化物)異構體雜質檢測、中間體3(N-芐基氨基醇)純度檢測、中間體4(N-芐基奈必洛爾)純度檢測、鹽酸奈必洛爾含量檢測、鹽酸奈必洛爾中起始原料1、中間體2，2'、中間體3含量檢測、鹽酸奈必洛爾中中間體4含量檢測及鹽酸奈必洛爾異構體檢測共九個檢測步驟，具體步驟如下：?

步驟一.高效液相色譜法測定起始原料1的產品純度?

選用十八烷基鍵合硅膠色譜柱，含0.4～0.6%三乙胺水與0.4～0.6%三乙胺甲醇為流動相，檢測波長選用260～290nm，洗脫條件為水相比有機相為50:50～70:30，洗脫流速為0.5～1.0mL/min。6-氟-色滿-2-羧酸的純度采用面積歸一化法確定。?

在本發明的具體實施方案中，所述十八烷基鍵合硅膠柱的顆粒度為3～5μm，優選5μm.；水相-有機相為含0.5%三乙胺水-含0.5%三乙胺甲醇；檢測波長選擇280nm；水相-有機相的比例為63:37；流速為1mL/min。?

步驟二.高效液相色譜法測定中間體2，2'的產品純度?

選用十八烷基鍵合硅膠色譜柱，水與甲醇作流動相，檢測波長選用260～290nm，洗脫條件為水比甲醇為30:70～50:50，洗脫速度為0.5～1.0mL/min。中間體2，2'的純度采用面積歸一化?法確定。?

在本發明的具體實施方案中，所述十八烷基鍵合硅膠柱的顆粒度為3～5μm，優選5μm.；檢測波長選擇280nm；水相-有機相的比例為40:60；流速為1mL/min。?

步驟三.高效液相色譜法測定中間體2，2'中異構體雜質的含量?

選用硅膠表面涂敷有直鏈淀粉－三(3,5－二甲苯基氨基甲酸酯)大賽璐高效手性正向分離柱，檢測波長選擇260～290nm，洗脫流動相為甲醇，洗脫速度為0.7～1.0mL/min；中間體2，2'中異構體雜質的含量采用面積歸一化法確定。?