[發明專利]新型的特異性細胞免疫應答體外檢測方法及其臨床應用

有效

• 申請號: 201410122051.1
• 申請日: 2014-03-29
• 公開（公告）號: CN103983785A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發明（設計）人: 陳仁奮;魏秀妹
• 申請（專利權）人: 陳仁奮
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

技術領域

本發明屬于臨床免疫及醫學實驗診斷領域，具體涉及一種新型的細胞免疫應答體外檢測技術。這種實驗方法基于檢測由Smith?(Sm)?合成肽抗原體外刺激外周血T細胞產生的細胞因子水平，為系統性紅斑狼瘡（SLE）的實驗診斷和治療監控提供參考。

背景技術

系統性紅斑狼瘡（SLE）是影響人群最廣泛、最嚴重的自身免疫病之一，通常好發于育齡女性，能引發全身多種組織及器官的炎癥病變。由于該疾病發作潛伏，病程遷延反復并不斷加重，臨床表現復雜多樣，診斷和治療難度大，世界衛生組織把它列為新世紀醫學領域急待攻克的堡壘。

該疾病的病因目前尚不清楚。傳統的觀點是SLE患者的多器官炎癥損害主要歸因于體液免疫紊亂引起的B?細胞異常活化產生的多種自身抗體，并通過抗原抗體免疫復合物沉積并激活補體等途徑造成。因此，臨床診斷,病情監控及治療的參考實驗指標幾乎都依賴血清中自身抗體。而近年來的大量研究表明，細胞介導的免疫應答及其產生的細胞因子，特別是炎癥性的細胞因子等異常可能是造成紅斑狼瘡病理炎癥的另一關鍵原因(YAP,?D.?Y.?&?LAI,?K.?N.?Cytokines?and?their?roles?in?the?pathogenesis?of?systemic?lupus?erythematosus:?from?basics?to?recent?advances.?J?Biomed?Biotechnol,?2010,?365083.)，并與體液免疫相互作用，在整個疾病的發生和發展過程中起重要作用（DAVIS,?L.?S.,?HUTCHESON,?J.?&?MOHAN,?C.?The?role?of?cytokines?in?the?pathogenesis?and?treatment?of?systemic?lupus?erythematosus.?J?Interferon?Cytokine?Res,?2011,?31,?781-9.）。最近Iwata?報道了一些SLE病人甚至出現以T細胞免疫紊亂為主導的發病機制（IWATA,?S.,?SAITO,?K.,?TOKUNAGA,?M.?&?TANAKA,?Y.?B?cell?or?T?cell-dominant?recurrence?after?rituximab?therapy?in?patients?with?SLE.?Ann?Rheum?Dis.?2012.?）。這樣，檢測細胞免疫應答的產物（如細胞因子）與自身抗體一樣，對SLE的診斷，監控與治療至關重要。

衡量細胞免疫應答的水平可通過檢測由免疫原體外刺激全血白細胞產生的細胞因子來衡量。雖然細胞因子能敏感地反映機體的細胞免疫反應，但由于多種生理或病理因素均可影響細胞因子的釋放，所以細胞因子本身不具疾病特異性（PICCOLI,?L.,?MERONI,?V.,?GENCO,?F.,?TAMAROZZI,?F.,?TINELLI,?C.,?FILICE,?C.?&?BRUNETTI,?E.?Serum?cytokine?profile?by?ELISA?in?patients?withechinococcal?cysts?of?the?liver:?a?stage-specific?approach?to?assess?their?biological?activity.?Clin?Dev?Immunol,?2012,?483935.）。至今為止，國際上尚未實現以檢測細胞因子來診斷自身免疫性疾病（包括SLE）的實驗技術。?

診斷及監控SLE?是基于綜合臨床表現及實驗檢查的美國風濕病學會（ACR）的分類標準，臨床醫生在判斷該標準規定的11項指標時受主觀因素影響較大，診斷準確性差，加上缺乏既敏感及特異的實驗指標，經常出現誤診或漏診。而對SLE的治療基本上依賴各類免疫抑制劑，藥物副作用大，常引發繼發性感染。雖然近年來不斷涌現出新型的治療藥物（細胞因子拮抗劑），臨床醫生對它們的選擇多依賴個人經驗作主觀判斷，存在盲目性。而目前國際上仍缺乏能指導細胞因子個體化治療的實驗方法（KALUNIAN,?K.?&?JOAN,?T.?M.?New?directions?in?the?treatment?of?systemic?lupus?erythematosus.?Curr?Med?Res?Opin.?2009.；RONNBLOM,?L.?&?ELKON,?K.?B.?Cytokines?as?therapeutic?targets?in?SLE.?Nat?Rev?Rheumatol,?2010,6,?339-347.）。