[發明專利]新型的特異性細胞免疫應答體外檢測方法及其臨床應用

有效

• 申請號: 201410122051.1
• 申請日: 2014-03-29
• 公開（公告）號: CN103983785A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發明（設計）人: 陳仁奮;魏秀妹
• 申請（專利權）人: 陳仁奮
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種新型的細胞免疫應答體外檢測方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）篩選并混合能被T細胞特異識別的Smith(Sm)合成肽，作為刺激待檢外周血白細胞的抗原，同時設立絲裂原PHA作陽性對照；

（2）將待檢血液與抗原混合，37℃培養20-24小時；

（3）檢測培養血上清液中特定細胞因子的水平，以判斷機體對特異性抗原Sm混合肽和非特異性免疫原絲裂原PHA的細胞免疫應答水平。

2.如權利要求1所述的細胞免疫應答體外檢測方法，其特征在于：所述的Sm混合肽抗原包含五條合成肽,?分別為Sm1、Sm2、Sm3、Sm4、Sm5?，具體氨基酸序列如下：

Sm1：?RGNNIRYFILPDSLPLDTLL；?????????

Sm2?：SHETVTIELKNGTQVHGTIT；???

Sm3：GVDVSMNTHLKAVKMT；???????????

Sm4：TVGKSSKMLQHIDYRMRCI；???

Sm5：?PMGIPPGRGTPMGMPPPGM。

3.?如權利要求1、2所述的細胞免疫應答體外檢測方法，其特征在于：所述的Sm合成肽抗原由FMOC固相合成方法自動或人工合成，經HPLC分析和純化，抗原純度90%以上。

4.一種如權利要求1、2、3所述的細胞免疫應答體外檢測方法的臨床應用，其特征在于包括：

（1）通過測定待檢血經Sm?混合肽刺激產生IL-6的含量，判斷患者對Sm混合肽抗原的刺激是否存在高水平的細胞免疫應答，以實驗診斷SLE；

（2）通過分析SLE患者經Sm混合肽抗原特異刺激后產生的細胞因子譜，為病人選擇細胞因子拮抗劑進行個體化治療提供實驗參考；

（3）通過觀察SLE患者外周血對絲裂原刺激所釋放的細胞因子的能力，既可以評估病人的整體細胞免疫功能狀態,?也可用來判定該實驗結果的可靠性，以排除假陰性結果。