[發(fā)明專利]雷帕霉素與環(huán)孢素A納米口服微乳液制備方法

在審

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• 申請日: 2014-03-27
• 公開（公告）號: CN103933546A
• 公開（公告）日: 2014-07-23
• 發(fā)明（設計）人: 海明潭;孔峰
• 申請（專利權）人: 北京科技大學
• 主分類號: A61K38/13
• 分類號: A61K38/13;A61K9/107;A61K47/44;A61K47/34;A61K47/14;A61P37/06;A61P35/00;A61K31/436
• 代理公司: 北京金智普華知識產權代理有限公司 11401
• 代理人: 皋吉甫

技術領域

本發(fā)明屬于免疫抑制劑納米口服藥物制備研究領域，特別涉及一種微乳液方法制備雷帕霉素、環(huán)孢素A、雷帕霉素+環(huán)孢素A組合納米口服溶液的方法。

背景技術

雷帕霉素（Rapamycin），是新型大環(huán)內酯的抗排斥藥物，在生物體內的主要靶標蛋白是mTOR，是目前世界上最新的強效免疫抑制劑，臨床上用于器官移植的抗排斥反應和治療類風濕性關節(jié)炎、紅斑狼瘡等自身免疫性疾病的治療。可能通過阻斷IL-2啟動的T細胞增殖而選擇性抑制T細胞，用于抗移植排斥反應。通過與相應免疫嗜素RMBP結合抑制細胞周期G0期和G1期，阻斷G1進入S期而發(fā)揮作用，其效應為：①抑制T和B細胞增殖；②抑制IL-1、IL-2、IL-6和IFN-γ誘導的淋巴細胞增殖；③抑制IgG和供者特異性抗體(細胞毒抗體)產生；④抑制單核細胞增殖。環(huán)孢素A由11個氨基酸組成的環(huán)狀多肽組成，是一種選擇性作用于T淋巴細胞的強效免疫抑制劑。通過與細胞內免疫嗜素親環(huán)蛋白結合，抑制輔助性T細胞活化及對IL-2的反應性，主要用于預防移植術后的移植物抗宿主(GVH)反應，或治療多種自身免疫病。臨床上主要用于肝、腎以及心臟移植的抗排異反應，也可與腎上腺皮質激素同用，治療免疫性疾病。雷帕霉素還具有抗腫瘤的作用,它通過與細胞內特異性親和蛋白FKBP-12?結合形成RAP-FKBP-12?復合物并與其靶蛋白mTOR?的FRB?域結合,抑制mTOR的蛋白激酶催化活性,使之對下游效應分子p70S6K、4EBP1/eIF4E?等磷酸化的調節(jié)作用減弱或消失,阻斷氨基酸等營養(yǎng)因子和多種生長因子轉導的信號下傳作用,從而抑制了翻譯的開始；Rapamycin?還能通過降低CDK-cyclin?復合物激酶的活性，使細胞周期阻滯在G1期，從而發(fā)揮抗腫瘤的作用。我們采用微乳液方法制備免疫抑制劑納米口服溶液體系為研究免疫抑制劑雷帕霉素、環(huán)孢素A納米口服溶液配方及雷帕霉素與環(huán)孢素A組合納米口服溶液體系的人體臨床實驗提供理論和實際指導依據。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種利用微乳液方法制備免疫抑制劑雷帕霉素、環(huán)孢素A納米口服溶液及免疫抑制劑雷帕霉素+環(huán)孢素A組合納米口服溶液體系的新方法，實現增加非水溶性免疫抑制劑的溶解度和滲透性并提高納米口服溶液的穩(wěn)定性，為免疫抑制劑藥物的口服藥物配方及組合藥物配方的人體臨床實驗研究提供了新方法。非水溶性抗癌藥物或免疫抑制劑等溶質被增溶在具有生物相容性的水包油微乳液納米溶液體系，提高疏水性免疫抑制劑的溶解度并降低藥物的副作用。

本發(fā)明的技術方案是：雷帕霉素與環(huán)孢素A納米口服微乳液制備方法，具體包括以下步驟：

步驟1.先制備具有生物相容性的水包油納米溶液體系:

將表面活性劑與助表面活性劑按照質量比1-3:1-2混合均勻，混合均勻后與生物相容性的油、去離子水按照質量百分比為：29-35：24-32：35-39混合，輕輕搖晃即可制備得到直徑為30納米的水包油微乳液體系；

步驟2.將一定量的克雷帕霉素或環(huán)孢素A或雷帕霉素+環(huán)孢素A固體溶解在步驟1制備得到的水包油微乳液體系中，在室溫或37度溫度下，以200-800轉/分的轉速下勻速混合2-24小時，抗癌藥物組合納米口服溶液體系。

取100微升的水包油包水乳液樣品，通過色譜-質譜方法分析雷帕霉素、環(huán)孢素A的濃度，得到1毫升微乳液體系雷帕霉素、環(huán)孢素A的最大溶解度。

進一步，所述步驟2中還可以將抗癌類藥物多烯紫杉醇疏水性抗癌藥物與雷帕霉素與按照質量比1:2-3的比例配比，加入同時步驟1制備得到的水包油微乳液體系中，在室溫或37度溫度下，以200-800轉/分的轉速下勻速混合2-24小時，得到雷帕霉素或環(huán)孢素A或雷帕霉素+環(huán)孢素A納米口服體系溶液。

進一步，所述生物相容性的油是食品級或醫(yī)藥級材料包括芝麻油、橄欖油或丙二醇單辛酸酯；

進一步，所述表面活性劑主要是食品級非離子表面活性劑包括聚氧乙烯基山梨醇月桂酸酯（包括聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60和聚山梨醇酯80）或蓖麻油聚氧乙烯醚。

進一步，所述助表面活性劑包括食品級材料聚氧乙烯和二氧二醇單乙烯醚。