[發(fā)明專利]檢測細菌對氟苯尼考耐藥性的LAMP方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410118217.2
• 申請日: 2014-03-27
• 公開（公告）號: CN103937883A
• 公開（公告）日: 2014-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李軍;曾蕓;馮世文;楊威;陳澤祥;潘艷;劉麗婭;彭昊;許力干;馬春霞;胡帥;禤雄標;柳峰;謝永平;謝宇舟;鐘舒紅
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/18;C12N15/11
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務(wù)所有限責任公司 45104
• 代理人: 楊立華

1.檢測細菌對氟苯尼考耐藥性的LAMP引物組，其特征在于包括外引物對F3和B3、內(nèi)引物對FIP和BIP，它們分別具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.4的堿基序列。

2.一種檢測細菌對氟苯尼考耐藥性的LAMP方法，其特征在于：利用LAMP引物組，在63℃恒溫反應(yīng)條件下，進行環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增反應(yīng)60min；所述LAMP引物組包括外引物對F3和B3、內(nèi)引物對FIP和BIP，它們分別具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.4的堿基序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測細菌對氟苯尼考耐藥性的LAMP方法，其特征在于擴增反應(yīng)的反應(yīng)體系以25μL計，包括：2×Reaction?Mix12.5μL，Bst?DNA?Polymerase1μL，Primer?FIP40pmol、BIP40pmol、F35pmol、B35pmol，細菌質(zhì)粒DNA2μL，Distilled?Water補足25μL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測細菌對氟苯尼考耐藥性的LAMP方法，其特征在于：所述擴增反應(yīng)在Loopamp實時濁度儀內(nèi)全程密閉監(jiān)控進行。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測細菌對氟苯尼考耐藥性的LAMP方法，其特征在于：所述擴增反應(yīng)后采用鈣黃綠素熒光染料進行熒光檢測，熒光染料在反應(yīng)前加入。