[發(fā)明專利]一種綠風(fēng)藤茶品種復(fù)壯的快速繁殖方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410110182.8
• 申請(qǐng)日: 2014-03-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103891613A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-07-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 武蕓;鄭小江;張澤;武玉蓮;卜貴軍;曾智;楊婷;方響亮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖北民族學(xué)院
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所 42001
• 代理人: 王敏鋒

1.一種綠風(fēng)藤茶品種復(fù)壯的組培快速繁殖方法，其步驟是：

A)?外植體的選取與滅菌：取綠風(fēng)藤茶幼嫩枝條的莖尖，經(jīng)表面滅菌后備用，外植體的選取與滅菌為當(dāng)年新萌發(fā)嫩枝的莖尖，剪掉嫩枝的葉片和卷須，切成長(zhǎng)0.4-0.6cm帶頂芽莖段，用洗潔精浸泡5~10?min后，刷洗干凈，流水沖洗2-4h，移至超凈工作臺(tái)上，用70%體積比的酒精震蕩清洗28-32S，無(wú)菌水洗2-4次，再放入質(zhì)量與體積之比為0.1%的升汞溶液中震蕩消毒6-8min，無(wú)菌水沖洗4-6次后，在解剖鏡下切下0.4-0.6mm的莖尖，接種到初代培養(yǎng)基上；

B）將滅菌后的綠風(fēng)藤茶幼嫩枝條的莖尖進(jìn)行初代培養(yǎng)：在無(wú)菌條件下將經(jīng)表面滅菌后的外植體接種在初代培養(yǎng)基中，培養(yǎng)15~20d后，轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)分化叢芽的培養(yǎng)基中；所述的初代培養(yǎng)基：WPM+6-BA1.5mg.L^-1+NAA0.2mg.L^-1+PVP2g.L^-1?+25g.L^-1蔗糖；或?MS+6-BA1.5?mg.L^-1+NAA0.2?mg.L^-1+?PVP2g.L^-1+25g.L^-1蔗糖；

C)增殖培養(yǎng)：在無(wú)菌條件下將叢芽切成單株接入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)30~45天叢生芽可增殖出5~8倍；根據(jù)對(duì)幼苗數(shù)量，每隔30~45d按同樣方法進(jìn)行幼苗再增殖培養(yǎng)；誘導(dǎo)叢生芽和芽增殖的培養(yǎng)基：MS+TDZ0.2mg.L^-1+IAA0.1mg.L^-1+25g.L^-1蔗糖；

D)壯苗培養(yǎng)：初代培養(yǎng)和增殖培養(yǎng)過(guò)程中，將增殖培養(yǎng)的叢生芽轉(zhuǎn)接到壯苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)25~30d；所述的壯苗培養(yǎng)基：MS+6-BA1.0?mg.L^-1+NAA0.1?mg.L^-1+25g.L^-1蔗糖；

E)?生根培養(yǎng)：將壯苗培養(yǎng)的叢生苗切成單株后，接種在生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，培養(yǎng)20~30d后，幼苗基部長(zhǎng)出3~8條根；所述的生根培養(yǎng)基：1/2MS+?PP₃₃₃0.2?mg.L^-1+IBA0.2mg.L^-1+20g.L^-1蔗糖；

F)?移栽：將生根組培苗移栽于基質(zhì)中，培育1~2個(gè)月至成苗，所述的移栽基質(zhì)由草炭:蛭石按體積比1:3配制而成。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種綠風(fēng)藤茶品種復(fù)壯的組培快速繁殖方法，其特征在于：所述的初代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)的培養(yǎng)條件是，光照強(qiáng)度為40μmol.m^-2.s^-1，光照時(shí)間12h.d^-1，其中初代培養(yǎng)的培養(yǎng)基pH6.0-6.5，培養(yǎng)溫度為20~21℃，增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)培養(yǎng)階段的培養(yǎng)溫度為23-25℃，培養(yǎng)基pH為5.6-6。