[發明專利]一種誘導多能性干細胞的培養體系

有效

• 申請號: 201410109226.5
• 申請日: 2014-03-21
• 公開（公告）號: CN104928251B
• 公開（公告）日: 2018-06-26
• 發明（設計）人: 周琪;顧奇;郝捷;王柳
• 申請（專利權）人: 中國科學院動物研究所
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 郭廣迅

1.一種用于誘導多能性干細胞的培養基，所述培養基為LBX液體培養基，包括氨基酸、維生素、無機鹽及其它組分；

其中，所述氨基酸包括50-150mg/L的L-精氨酸鹽酸鹽、10-20mg/L的L-組氨酸鹽酸鹽一水物、25-50mg/L的L-異亮氨酸、25-50mg/L的L-亮氨酸、40-80mg/L的L-賴氨酸鹽酸鹽、7-15mg/L的L-蛋氨酸、18-40mg/L的L-苯丙氨酸、17-40mg/L的L-絲氨酸、17-60mg/L的L-蘇氨酸、2-8mg/L的L-色氨酸、15-50mg/L的L-酪氨酸二鈉鹽和10-60mg/L的L-纈氨酸；

所述維生素包括0.5-8mg/L的氯化膽堿、0.5-5mg/L的D-泛酸鈣、0.5-4mg/L的葉酸、0.5-4mg/L的煙酰胺、0.5-4mg/L的鹽酸吡哆醇、0.05-1mg/L的核黃素、0.5-4mg/L的鹽酸硫胺素和1-10mg/L的肌醇；

所述無機鹽包括30-100mg/L的無水氯化鈣、2-30mg/L的無水硫酸鎂、80-300mg/L的氯化鉀、300-1000mg/L的碳酸氫鈉、1000-5000mg/L的氯化鈉和20-100mg/L的磷酸二氫鈉；

所述其它組分包括500-2000mg/L的D-葡萄糖、500-2000mg/L的羥乙基哌嗪乙磺酸、0.005-0.1mg/L的辛硫酸、50-400mg/L的腐胺、100-600mg/L的丙酮酸鈉、0.04-0.40mg/L的胸苷、4-50mg/L的L-肉堿、2000-20000mg/L的人轉鐵蛋白、0.2-3mg/L的孕酮、0.05-2mg/L的亞硒酸鹽鈉、2-80mg/L的乙醇胺、50-400mg/L的D-半乳糖、40-400mg/L的過氧化氫酶、2-40mg/L的谷胱甘肽、4-80mg/L的超氧化物歧化酶、30-400mg/L的視黃醇、30-400mg/L的視黃醇乙酸酯、300-4000mg/L的維生素E、300-4000mg/L的維生素E醋酸酯、0.05-0.5mg/ml的牛血清白蛋白、0.5-5μg/ml的胰島素、500-4000U/ml的白血病抑制因子和4-100ng/ml的堿性成纖維細胞生長因子。

2.根據權利要求1所述的培養基，其中，所述氨基酸還包括以下氨基酸中的一種或多種：10-50mg/L的甘氨酸、2-40mg/L的L-丙氨酸、0.83-50mg/L的L-天冬酰胺一水合物、6-50mg/L的L-天冬氨酸、1-20mg/L的L-半胱氨酸、4-100mg/L的L-精氨酸鹽酸鹽一水物、4-30mg/L的L-半胱氨酸二鹽酸鹽、5-70mg/L的L-谷氨酸、7-100mg/L的L-脯氨酸。

3.根據權利要求1所述的培養基，其中，所述維生素還包括以下維生素中的一種或多種：0.5-4mg/L的維生素H、0-10mg/L的維生素b12。

4.根據權利要求1所述的培養基，其中，所述無機鹽還包括以下無機鹽中的一種或多種：0-0.001mg/L的五水硫酸銅、0-0.01mg/L的九水硝酸鐵、0-0.5mg/L的七水硝酸鐵、0-50mg/L的無水氯化鎂、4-50mg/L的無水磷酸氫二鈉、0-5mg/L的七水硫酸鋅。

5.根據權利要求1所述的培養基，其中，所述其它組分包括以下的一種或多種：0.1-1mg/L的次黃嘌呤鈉、400-2000mg/L的亞油酸、0-5mg/L的酚紅、0.005-0.05mg/L的腐胺二鹽酸、0-3000mg/L的亞麻酸、0.4-4mM的L-谷酰胺、20-200μg/ml的鏈霉素溶液、20-200U/mL的青霉素、0-0.1mM的β-硫基乙醇、0.5-5μM的轉化生長因子抑制劑(SB431542)、0.5-3μM絲裂原活化蛋白激酶抑制劑(PD0325901)、1-10μM的肝糖原合成激酶3β(GSK3β)受體的選擇性抑制劑(CHIR99021)、10-200ng/ml的維生素C。

6.根據權利要求1所述的培養基，所述培養基包括下表所述的組分：