[發明專利]對植物具有多種功能的海洋芽孢桿菌及應用

有效

• 申請號: 201410106725.9
• 申請日: 2014-03-17
• 公開（公告）號: CN104928200B
• 公開（公告）日: 2018-01-19
• 發明（設計）人: 田黎
• 申請（專利權）人: 青島科技大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;A01P21/00;C12R1/07
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.對植物具有多種功能的海洋芽孢桿菌，從海洋生境獲得海洋芽孢桿菌BY-1188菌株(Bacillus marinus)，經人工誘變育種和培養條件優化，其適宜的人工培養發酵的條件為：

1)以其保藏編號為：CGMCC No.6187的BY-1188菌株；

2)菌株在上述固體培養基置22℃-27℃溫箱培養2-3天，將固體培養基生長好的菌體刮下，接入步驟1中的培養液培養3天為種子液，再將種子液接入40-50L上述培養液中，22℃-27℃，轉速150rpm，振蕩培養3-5天，獲得發酵液，并可逐級放大。

2.根據權利要求1所述的對植物具有多種功能的海洋芽孢桿菌的應用，其特征在于：海洋芽孢桿菌BY-1188菌株采用對峙培養法、96孔板法、抑菌率統計法3種抑菌測試聯合測試方法選出，菌株實用性強：

1)對峙培養法、抑菌率統計法為常規方法，對農業常見和危害嚴重的9種植物病原真菌：稻瘟霉菌Pyricularia oryzae、茄鏈孢菌Alternaria salani、鐮孢霉菌Fusarium oxysporrum、灰葡萄孢菌Botrytis cinerea、大麗輪枝菌Verticillium dahliae、芽枝霉菌Cladosporium fulvum、辣椒疫霉菌Phytophthora capsici、絲核菌Rhizoctonia solani赤霉菌Fusarium graminearum進行抑菌測試，對峙培養法中抑菌圈30-35mm，抑菌率統計法中抑菌率73.33-87.60％；

2)96孔板為常規測試基礎上創制的改良方法，以發酵液直接測，測試單位為μL/mL，供試靶標病原菌為：稻瘟霉菌Pyricularia oryzae和茄鏈孢菌Alternaria salani，供試靶標病原菌孢子懸浮液以每孔50μL的量加入到96孔板的第1行各孔(A孔)中，之后將海洋芽孢桿菌BY-1188菌株的無細胞濾液50μL，加入各孔混勻，并依次倍半稀釋到第8行最后1孔(H孔)，以加無菌水的孔做為對照，27℃靜置培養3小時后觀察，觀測標準為：對照的病原菌孢子90％為正常萌發，處理的病原菌孢子死亡或畸形率在90％為抑制，每個處理重復3次，處理抑菌濃度越小，表示活性越高，BY-1188的抑菌活性MIC為2，顯示強抑菌活性。

3.根據權利要求1所述的對植物具有多種功能的海洋芽孢桿菌的應用，其特征在于：海洋芽孢桿菌BY-1188菌株在植物活體上對辣椒疫霉病、番茄灰霉病防治效果分別為88.4％和85.1％，防治效果超過傳統化學農藥防治水平。

4.根據權利要求1所述的對植物具有多種功能的海洋芽孢桿菌的應用，其特征在于：海洋芽孢桿菌BY-1188菌株在普通耕作土及海濱鹽漬土栽種的黃瓜、番茄、辣椒、甘藍、甜瓜、茄子均能正常定殖，浸根栽種5天后根、莖、葉的定殖數分別可達5.98×10³、6.24×10³、3.78×10³，定殖數可維持15-20天。

5.根據權利要求1所述的對植物具有多種功能的海洋芽孢桿菌的應用，其特征在于：海洋芽孢桿菌BY-1188菌株對植物種子的萌發和幼苗的生長都具有促進作用，菌液處理的番茄植株苗健壯，葉片大，葉色濃綠，莖稈粗，根毛長，幼苗的株高、根長、莖粗分別增加65.0％-84.4％；葉綠素a、b、總葉綠素分別提高60.0％，-143.9％，植株鮮重、干重增加86.0％-115.8％。

6.根據權利要求1所述的對植物具有多種功能的海洋芽孢桿菌的應用，其特征在于：海洋芽孢桿菌BY-1188菌株在鹽漬土壤誘導植物抗鹽，菌株降低了根、葉Na⁺的積聚39.5％，提高根、葉K⁺含量36.09％，植株含水量提高73.66％，植株鹽害癥狀減輕，鹽害指數降低了56.67％。