[發明專利]內生生防菌株及其制成的生防菌劑的制備方法與應用

有效

• 申請號: 201410106089.X
• 申請日: 2014-03-21
• 公開（公告）號: CN104017748B
• 公開（公告）日: 2017-02-08
• 發明（設計）人: 馬耀華;譚小艷
• 申請（專利權）人: 棗莊學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/125
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技術領域

本發明涉及一種生物菌種防治石榴腐爛的領域，尤其涉及一種內生生防菌株及其制成的生防菌劑的制備方法與應用。?

背景技術

石榴（Punica?granatum），別名安石榴，石榴科石榴屬。原產于伊朗、阿富汗等國家，現已在亞洲、非洲、歐洲沿地中海各地，均作為果樹栽培，而以非洲尤多。在我國，除了東北等極寒冷的少數省區外，均適合石榴栽培，我國已經形成了最有影響的石榴五大產區，分別為陜西臨潼、山東棗莊、安徽懷遠、四川會理和云南巧家。石榴是集食用、藥用以及觀賞于一體的水果，特別是石榴中富含抗氧化物質，是延緩衰老、預防動脈硬化且減緩癌變進程的高水平抗氧化劑。調查表明，我國石榴20%~30%在中秋節和國慶節消費，10%用于加工，50%~60%經過儲藏延長貨架期在春節前后上市。但是石榴采后果實在貯藏過程中，受到多種致病菌共同作用導致果實腐爛變質，通常腐爛率是30%，嚴重時可達70%，嚴重影響了石榴的經濟價值。對于貯藏期石榴果實腐爛病由什么病菌引起有兩種觀點：大部分學者（戴芳瀾1934；周又生1999；Jin&Chang?2002，等）認為是由石榴干腐病菌石榴鮮殼孢(?Zythia?Versoniana?Sacc.)引起；2007年付娟妮認為是葡萄座腔菌（Botryosphaeria?dothidea）引起的。目前控制石榴采后腐爛的有效措施是低溫貯藏結合化學防腐劑、熱、輻射、氣調等。常使用的化學防腐劑有甲基托布津（Thiophanate-Methyl）、多菌靈（Carbendazim）、敵霉煙劑（TBZ）等?；瘜W防治是果蔬產后病害防治的主要途徑，但隨著發現有致癌作用，且污染環境的化學殺菌劑越來越多，使其在果品上的應用受到限制。另外，一些殺菌劑的頻繁使用也使病菌產生抗性，防效大為降低，如葡萄孢菌（Botrytis?cinerea）、青霉菌（Penicillium?sp.）、梨形毛霉菌（Mufcor?piriformis?Fischer)早已對苯來特（Benlate）有抗性，由于在柑桔上長期使用苯并咪哇類殺菌劑（Benzimidazole?fungicide），使原來對其不敏感的柑桔黑腐病菌（Alternaria?citri?Ellis?et.?Pierce）和柑桔酸腐病菌（Oospora?citriaurantii?ex?Persoon）種群上升成為新問題。隨著消費者對無公害農產品、綠色食品和有機食品的強烈需求，開發高效、低毒、無殘留的生物農藥已成為迫切希望。生物農藥是指利用生物產生的生物活性物質或生物活體作為農藥，以及人工合成的與天然化合物結構相同的農藥，是不污染環境的綠色農藥，可望成為解決化學農藥殘留污染的有效途徑之一。近年來植物根部、葉部病害生物防治的成功實例，大大激發人們將生物防治擴展到果蔬產后病害的防治研究領域。特別自1983年起美國農部以Wilson為主的一批美、以、澳、法等國科學家，在這方面做了大量的研究工作，在美國，已有防治核果類、仁果類、柑桔及一些蔬菜產后病害的幾種拮抗菌取得了專利或正在審定。目前，將生物防治技術用于石榴貯藏防腐的研究，國內外沒有相關報道。綜上所述，篩選有效的生防細菌，開發新型、安全有效的微生物殺菌劑是控制石榴腐爛病的發生，減少貯藏期石榴的損失，促進石榴產業經濟穩健發展的迫切需要。?

發明內容

本發明的目的是提供一種內生生防菌株及其制成的生防菌劑的制備方法與應用，能夠有效的防止石榴的腐爛、無污染、抑菌率高。?

為實現上述目的，本發明采用的技術方案為：?

一種內生生防菌株，所述菌株為枯草芽孢桿菌Bacillus?subtilis，己于2014年1月26日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為CGMCC?NO.8812。保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所。