[發明專利]豬細環病毒I型和II型的雙重實時熒光PCR檢測方法

無效

• 申請號: 201410105912.5
• 申請日: 2014-03-20
• 公開（公告）號: CN103882149A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: 楊春華;孫思揚;胡婷;石磊
• 申請（專利權）人: 江西出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫綜合技術中心
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 深圳鼎合誠知識產權代理有限公司 44281
• 代理人: 羅瑤;彭家恩

1.一種用于豬細環病毒I型和II型的雙重檢測的引物，其特征在于：所述引物包括第一引物對和第二引物對，所述第一引物對的上游引物和下游引物分別含有Seq?ID?No.1和Seq?ID?No.2所述序列，所述第二引物對的上游引物和下游引物分別含有Seq?ID?No.4和Seq?ID?No.5所述序列；

Seq?ID?No.1：5’-GGTTCAGGAGGCTCAATTTGG-3’

Seq?ID?No.2：5’-TTTGAATTTAACGGTTTTCAGTCTTC-3’

Seq?ID?No.4：5’-TATCGGGCAGGCGGTAATC-3’

Seq?ID?No.5：5’-TACGCTACCGTCAGCCATCTTT-3’。

2.根據權利要求1所述的引物，其特征在于：所述第一引物對為檢測豬細環病毒I型的引物對，所述第二引物對為檢測豬細環病毒II型的引物對。

3.一種用于豬細環病毒I型和II型的雙重檢測的探針，其特征在于：所述探針包括第一探針和第二探針，所述第一探針含有Seq?ID?No.3所示序列，所述第二探針含有Seq?ID?No.6所示序列；

Seq?ID?No.3：5’-TCGCTTCGCTCGCACCACGT-3’

Seq?ID?No.6：5’-AACCGGGCCCCCCTCGATG-3’。

4.根據權利要求3所述的探針，其特征在于：所述第一探針為檢測豬細環病毒I型的探針，所述第二探針為檢測豬細環病毒II型的探針。

5.根據權利要求4所述的探針，其特征在于：所述第一探針和第二探針的5’端都標記有熒光報告基團，3’端都標記有熒光淬滅基團。

6.根據權利要求5所述的探針，其特征在于：所述第一探針的5’端標記的熒光報告基團為FAM，3’端標記的熒光淬滅基團為BHQ1；所述第二探針的5’端標記的熒光報告基團為HEX，3’端標記的熒光淬滅基團為BHQ1。

7.一種豬細環病毒I型和II型的雙重實時熒光PCR檢測方法，包括采用權利要求1或2所述的引物與權利要求5或6所述的探針配對進行Taqman熒光定量PCR檢測。

8.根據權利要求7所述的雙重實時熒光PCR檢測方法，其特征在于：所述第一引物對與所述第一探針配對用以檢測豬細環病毒I型，所述第二引物對與所述第二探針配對用以檢測豬細環病毒II型。

9.一種豬細環病毒I型和II型的雙重檢測的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒中含有權利要求1或2所述的引物。

10.根據權利要求9所述的試劑盒，其特征在于：所述檢測試劑盒中還含有權利要求3-6任一項所述的探針。