[發明專利]一種雙中性蛋白酶分步酶解熱榨花生粕制備花生肽的方法

在審

• 申請號: 201410104323.5
• 申請日: 2014-03-20
• 公開（公告）號: CN103865972A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 王強;劉紅芝;李寧;劉麗;胡暉;石愛民;段玉權
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農產品加工研究所
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 史霞

1.一種雙中性蛋白酶分步酶解熱榨花生粕制備花生肽的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一、將熱榨花生粕與蒸餾水混合，制備質量濃度為13～15％的熱榨花生粕溶液，并測定所述熱榨花生粕中花生蛋白的含量；

步驟二、調節并保持所述熱榨花生粕溶液的溫度為40～50℃，向所述熱榨花生粕溶液中加入中性蛋白酶，進行酶解反應1.5～2.0h，得到第一酶解液，其中所述中性蛋白酶的加入量根據所述熱榨花生粕溶液的質量濃度及所測定的熱榨花生粕中花生蛋白的含量計算得到；

步驟三、向所述第一酶解液中加入復合蛋白酶，保持溫度40～50℃，進行酶解反應2.0～3.0h，得到第二酶解液，其中所述復合蛋白酶的加入量根據所述熱榨花生粕溶液的質量濃度及所測定的熱榨花生粕中花生蛋白的含量計算得到；

步驟四、將所述第二酶解液中的所述中性蛋白酶和復合蛋白酶滅活，離心取上清液，得到花生肽溶液。

2.如權利要求1所述的雙中性蛋白酶分步酶解熱榨花生粕制備花生肽的方法，其特征在于，步驟二中所述中性蛋白酶的酶解反應時間為1.5h，溫度為45℃。

3.如權利要求2所述的雙中性蛋白酶分步酶解熱榨花生粕制備花生肽的方法，其特征在于，步驟三中所述復合蛋白酶的酶解反應時間為2.5h，溫度為45℃。

4.如權利要求3所述的雙中性蛋白酶分步酶解熱榨花生粕制備花生肽的方法，其特征在于，步驟二中所述中性蛋白酶的加入量為5200～6500U／g花生蛋白，步驟三中所述復合蛋白酶的加入量為249～499U／g花生蛋白。

5.如權利要求4所述的雙中性蛋白酶分步酶解熱榨花生粕制備花生肽的方法，其特征在于，步驟二中所述中性蛋白酶的加入量為5200U／g花生蛋白，步驟三中所述復合蛋白酶的加入量為374U／g花生蛋白。

6.如權利要求5所述的雙中性蛋白酶分步酶解熱榨花生粕制備花生肽的方法，其特征在于，所述熱榨花生粕中花生蛋白的含量通過凱氏定氮法測定。

7.如權利要求1所述的雙中性蛋白酶分步酶解熱榨花生粕制備花生肽的方法，其特征在于，步驟一中所述熱榨花生粕溶液的質量濃度為14％。

8.如權利要求1所述的雙中性蛋白酶分步酶解熱榨花生粕制備花生肽的方法，其特征在于，步驟四中通過將所述第二酶解液升溫至90～95℃，并保持該溫度10～20min進行所述中性蛋白酶和復合蛋白酶的滅活；所述離心的條件為4000～4500rpm離心20～30min。

9.如權利要求1所述的雙中性蛋白酶分步酶解熱榨花生粕制備花生肽的方法，其特征在于，步驟三中所述復合蛋白酶由內切酶和外切酶組成，步驟二中所述的中性蛋白酶由枯草芽孢桿菌經過發酵提取得到。

10.如權利要求6、7或8所述的雙中性蛋白酶分步酶解熱榨花生粕制備花生肽的方法，其特征在于，步驟四中所得到的花生肽溶液經過干燥，制備為固體花生肽。