[發明專利]一種檢測11種常見感染性腹瀉病原體的基因芯片及其應用

有效

• 申請號: 201410101768.8
• 申請日: 2014-03-18
• 公開（公告）號: CN103911443A
• 公開（公告）日: 2014-07-09
• 發明（設計）人: 孫成銘;欒材富;劉杰;伊茂禮;李少君;吳金英;張守信;段麗君;孫雋;龔磊;張成林
• 申請（專利權）人: 煙臺毓璜頂醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 王澎

1.一組針對十一種感染性腹瀉病原體的基因芯片檢測探針，包括副溶血弧菌探針、創傷弧菌探針、霍亂弧菌探針、溶藻弧菌探針、弗尼斯弧菌探針、志賀氏菌屬探針、大腸桿菌探針、氣單胞菌探針、沙門氏菌探針、彎曲菌探針，以及變形桿菌探針；其中，所述副溶血弧菌探針的序列選自SEQ?ID?NO：1-10中的任意一種或多種，所述創傷弧菌探針的序列選自SEQ?ID?NO：11-18中的任意一種或多種，所述霍亂弧菌探針的序列選自SEQ?ID?NO：19-30中的任意一種或多種，所述溶藻弧菌探針的序列選自SEQ?ID?NO：31-40中的任意一種或多種，所述弗尼斯弧菌探針的序列選自SEQ?ID?NO：41-51中的任意一種或多種，所述志賀氏菌探針的序列選自SEQ?ID?NO：52-64中的任意一種或多種，所述大腸桿菌探針的序列選自SEQ?ID?NO：65-76中的任意一種或多種，所述氣單胞菌探針的序列選自SEQ?ID?NO：77-86中的任意一種或多種，所述沙門氏菌探針的序列選自SEQ?ID?NO：87-96中的任意一種或多種，所述彎曲菌探針的序列選自SEQ?ID?NO：97-107中的任意一種或多種，所述變形桿菌探針的序列選自SEQ?ID?NO：108-117中的任意一種或多種。

2.一種檢測十一種感染性腹瀉病原體的基因芯片，其特征在于，所述基因芯片上整合了權利要求1所述的基因芯片檢測探針。

3.如權利要求2所述的基因芯片，其特征在于，所述基因芯片還包括芯片基片。

4.如權利要求3所述的基因芯片，其特征在于，所述芯片基片為氨基基片。

5.一種檢測十一種感染性腹瀉病原體的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）提取待測樣本的模板DNA；

2）模板DNA的擴增與標記；

3）擴增標記產物與權利要求2-4任一權利要求所述基因芯片雜交；

4）雜交后的芯片掃描和結果判讀。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟2）所述模板DNA的擴增采用通用PCR引物，所述通用PCR引物的序列如SEQ?ID?NO：118-119所示。

7.如權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟2）所述模板DNA的擴增，其擴增的聚合酶鏈反應的反應體系如下：

8.如權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟2）所述模板DNA的擴增，其擴增的聚合酶鏈反應程序為：94℃5min；然后按94℃30s，55℃30s，72℃90s做35個循環；最后72℃10min。

9.權利要求1所述針對十一種感染性腹瀉病原體的基因芯片檢測探針，以及權利要求2-4任一權利要求所述檢測十一種感染性腹瀉病原體的基因芯片在制備腹瀉病原體檢測制劑中的應用。