[發(fā)明專利]重組型凝血酶原的制造方法、載體DNA及試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410095588.3 | 申請日： | 2014-03-14 |
| 公開（公告）號： | CN104046606B | 公開（公告）日： | 2020-02-14 |
| 發(fā)明（設計）人： | 坂東孝彥;菅井睦美 | 申請（專利權(quán)）人： | 希森美康株式會社 |
| 主分類號： | C12N9/74 | 分類號： | C12N9/74;C12N15/866;C12Q1/56 |
| 代理公司： | 11038 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務所 | 代理人： | 李英 |
| 地址： | 日本*** | 國省代碼： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 重組 凝血酶原 制造 方法 載體 dna 試劑盒 | ||
1.重組型凝血酶原的制造方法，其包括：
提供下述載體DNA的步驟，所述載體DNA整合有編碼MBP、SEQ ID NO:2或者NusA標簽的基因和編碼凝血酶原的基因、和
在鱗翅目昆蟲或上述鱗翅目昆蟲的培養(yǎng)細胞中表達融合有標簽的凝血酶原。
2.權(quán)利要求1的方法，還包括下述步驟：
從上述表達步驟得到的上述鱗翅目昆蟲或上述鱗翅目昆蟲的培養(yǎng)細胞獲得含上述融合有標簽的凝血酶原的可溶性級分。
3.權(quán)利要求1的方法，其中
在上述載體DNA中，編碼上述標簽的基因以上述標簽融合到凝血酶原的N末端側(cè)的方式整合。
4.權(quán)利要求1的方法，其中
上述載體DNA整合有編碼SEQ ID NO:7～9中任一個所示的氨基酸序列的基因。
5.權(quán)利要求1的方法，其中
在上述表達步驟中，上述融合有標簽的凝血酶原在上述鱗翅目昆蟲中表達。
6.權(quán)利要求1的方法，其中
在上述表達步驟中，上述融合有標簽的凝血酶原在上述鱗翅目昆蟲的蛹中表達。
7.權(quán)利要求1的方法，其中
上述鱗翅目昆蟲是蠶。
8.權(quán)利要求1的方法，其中
上述表達步驟包括用以上述載體DNA重組了的桿狀病毒轉(zhuǎn)染上述鱗翅目昆蟲或上述鱗翅目昆蟲的培養(yǎng)細胞的步驟。
9.權(quán)利要求1～8中任一項的方法，其中
上述載體DNA中整合有編碼蛋白質(zhì)分泌信號序列的基因。
10.權(quán)利要求9的方法，其中
上述蛋白質(zhì)分泌信號是選自來自凝血酶原的分泌信號序列、來自蠶的30K信號序列、及來自蠶的SP信號序列中的至少1種。
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