[發明專利]重組型凝血酶原的制造方法、載體DNA及試劑盒

有效

• 申請號: 201410095588.3
• 申請日: 2014-03-14
• 公開（公告）號: CN104046606B
• 公開（公告）日: 2020-02-14
• 發明（設計）人: 坂東孝彥;菅井睦美
• 申請（專利權）人: 希森美康株式會社
• 主分類號: C12N9/74
• 分類號: C12N9/74;C12N15/866;C12Q1/56
• 代理公司: 11038 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所
• 代理人: 李英

1.重組型凝血酶原的制造方法，其包括：

提供下述載體DNA的步驟，所述載體DNA整合有編碼MBP、SEQ ID NO:2或者NusA標簽的基因和編碼凝血酶原的基因、和

在鱗翅目昆蟲或上述鱗翅目昆蟲的培養細胞中表達融合有標簽的凝血酶原。

2.權利要求1的方法，還包括下述步驟：

從上述表達步驟得到的上述鱗翅目昆蟲或上述鱗翅目昆蟲的培養細胞獲得含上述融合有標簽的凝血酶原的可溶性級分。

3.權利要求1的方法，其中

在上述載體DNA中，編碼上述標簽的基因以上述標簽融合到凝血酶原的N末端側的方式整合。

4.權利要求1的方法，其中

上述載體DNA整合有編碼SEQ ID NO:7～9中任一個所示的氨基酸序列的基因。

5.權利要求1的方法，其中

在上述表達步驟中，上述融合有標簽的凝血酶原在上述鱗翅目昆蟲中表達。

6.權利要求1的方法，其中

在上述表達步驟中，上述融合有標簽的凝血酶原在上述鱗翅目昆蟲的蛹中表達。

7.權利要求1的方法，其中

上述鱗翅目昆蟲是蠶。

8.權利要求1的方法，其中

上述表達步驟包括用以上述載體DNA重組了的桿狀病毒轉染上述鱗翅目昆蟲或上述鱗翅目昆蟲的培養細胞的步驟。

9.權利要求1～8中任一項的方法，其中

上述載體DNA中整合有編碼蛋白質分泌信號序列的基因。

10.權利要求9的方法，其中

上述蛋白質分泌信號是選自來自凝血酶原的分泌信號序列、來自蠶的30K信號序列、及來自蠶的SP信號序列中的至少1種。