[發(fā)明專利]構(gòu)建液相色譜-質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)未知毒物的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410093316.X
• 申請(qǐng)日: 2014-03-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103823008A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-05-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邵兵;張晶;郭巧珍;楊奕;尹杰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京市疾病預(yù)防控制中心
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.構(gòu)建液相色譜-質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)樣品中未知毒物的方法，其特征在于，包括：(1)采用超高效液相色譜-四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜方法構(gòu)建常見(jiàn)毒物的液相色譜-質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)；(2)樣品處理和檢測(cè)，將待測(cè)樣品用甲醇或乙腈超聲提取得提取液，將所述提取液離心，取上清液，在與步驟(1)相同的測(cè)試方法和測(cè)試條件下，測(cè)定所述上清液的液相色譜-質(zhì)譜圖；(3)將步驟(2)所述的液相色譜-質(zhì)譜圖與步驟(1)所述的常見(jiàn)毒物的液相色譜-質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，判斷樣品中未知毒物的種類。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建液相色譜-質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)樣品中未知毒物的方法，其特征在于，所述步驟(1)采用超高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜方法構(gòu)建常見(jiàn)毒物的液相色譜-質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)的步驟包括：1.1信息收集，收集常見(jiàn)毒物藥物的相關(guān)信息，包含英文名、CAS號(hào)、分子量、分子式等；1.2標(biāo)準(zhǔn)溶液制備，分別稱量2000余種毒物藥物，以甲醇為溶劑，配制成1-10mg／L的標(biāo)準(zhǔn)溶液；1.3數(shù)據(jù)采集，將所述標(biāo)準(zhǔn)溶液注入超高效液相色譜儀，再經(jīng)四級(jí)桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀分析，其中超高效液相色譜儀的色譜柱為Waters?BEH?C18(100mm×2.1mm，1.7μm)色譜柱，四級(jí)桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀分別選擇在正離子模式、負(fù)離子模式下進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，得目標(biāo)毒物藥物的液相色譜質(zhì)譜圖；1.4譜庫(kù)構(gòu)建，將目標(biāo)毒物藥物質(zhì)譜圖，添加入液相色譜質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)中，同時(shí)輸入英文名、CAS號(hào)、分子量、分子式、保留時(shí)間等信息。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的構(gòu)建液相色譜-質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)樣品中未知毒物的方法，其特征在于，所述步驟1.3的色譜條件為：柱溫：40℃；流動(dòng)相：A相為乙腈，B相為0.1％(v／v)甲酸水溶液或水，其中質(zhì)譜采用正離子模式采集時(shí)，B相為0.1％(v／v)甲酸水溶液，質(zhì)譜采用負(fù)離子模式采集時(shí)，B相為水；流速：0.4mL／min，流動(dòng)相梯度洗脫程序：0～2min3％A；2.0～14.0min3％A線性升至100％A，保持1min，然后回到初始流動(dòng)相保持2.5min，準(zhǔn)備下一次進(jìn)樣，進(jìn)樣體積5μl；質(zhì)譜條件：離子源：電噴霧離子源，正離子模式(ESI+)和負(fù)離子模式(ESI-)；離子源溫度：110℃；毛細(xì)管電壓：3.1kV；脫溶劑氣溫度：400℃；脫溶劑氣流量：700L／h氮?dú)猓诲F孔電壓：35V；錐孔吹掃氣：50L／h；采用MSE模式，采集范圍：m／z50～1000Da；以亮氨酸腦啡肽(濃度50ng／mL，m／z：556.2771)進(jìn)行實(shí)時(shí)校準(zhǔn)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建液相色譜-質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)樣品中未知毒物的方法，其特征在于，所述步驟(2)的樣品處理為：將1.00g的樣品放于15mL具塞離心管中，用10mL甲醇或乙腈超聲提取10min，10000rpm離心5min，轉(zhuǎn)出上清液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的構(gòu)建液相色譜-質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)樣品中未知毒物的方法，其特征在于，所述步驟(3)的比對(duì)是根據(jù)樣品的保留時(shí)間和質(zhì)譜碎片與所述的常見(jiàn)毒物的液相色譜-質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行搜索比對(duì)，判斷樣品中未知毒物的種類。

6.根據(jù)權(quán)利要求1至5任一所述的構(gòu)建液相色譜-質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)樣品中未知毒物的方法，其特征在于，未知毒物包括貝類毒素、毒麻品、真菌毒素、農(nóng)藥、鼠藥、激素、β-受體激動(dòng)劑、β-受體阻斷劑、抗生素等毒物藥物。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的構(gòu)建液相色譜-質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)樣品中未知毒物的方法，其特征在于，所述貝類毒素包括麻痹毒素、石蛤毒素等；所述毒麻品包括海洛因、可卡因、美沙酮、三唑侖、氯胺酮、氟哌啶醇等；真菌毒素包括黃曲霉毒素、展青霉素、菊青霉素、伏馬菌素、赭曲霉毒素、玉米吃霉醇類等；農(nóng)藥包括殺蟲(chóng)劑、除草劑、殺菌劑、促生長(zhǎng)劑等；鼠藥包括氯鼠酮、溴鼠酮、溴敵隆、溴鼠靈、氟鼠靈、敵鼠、氯敵鼠等；激素包括雌激素、雄激素、皮質(zhì)醇激素、孕激素等。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的構(gòu)建液相色譜-質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)樣品中未知毒物的方法，其特征在于，可用于食物中毒分析。