[發明專利]一種利用蛋白支架提高大腸桿菌中異戊二烯合成的方法有效
| 申請號： | 201410088310.3 | 申請日： | 2014-03-11 |
| 公開（公告）號： | CN103898149A | 公開（公告）日： | 2014-07-02 |
| 發明（設計）人： | 李春;屈虹男;李哲;王翠薇 | 申請（專利權）人： | 北京理工大學 |
| 主分類號： | C12N15/70 | 分類號： | C12N15/70;C12N1/21;C12P5/02;C12R1/125;C12R1/19 |
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| 地址： | 100081 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 蛋白 支架 提高 大腸桿菌 中異戊二烯 合成 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種提高大腸桿菌異戊二烯合成的方法，其特征在于：利用支架蛋白將脫氧木酮糖-5-磷酸合成酶（DXS）、脫氧木酮糖-5-磷酸還原異構酶（DXR）及2-甲基赤蘚糖醇-4-焦磷酸合成酶（IspD）共區域化，提高異戊二烯前體物質二甲基丙烯基焦磷酸（DMAPP）及異戊二烯焦磷酸（IPP）的積累量，再通過表達植物來源的異戊二烯合成酶（IspS）實現異戊二烯的合成。
2.如權利要求1所述的方法，其中所述脫氧木酮糖-5-磷酸合成酶（DXS）、脫氧木酮糖-5-磷酸還原異構酶（DXR）及2-甲基赤蘚糖醇-4-焦磷酸合成酶（IspD）這三種酶分子的過表達和共區域化可增加異戊二烯前體物質DMAPP的含量。
3.如權利要求1所述的脫氧木酮糖-5-磷酸合成酶（DXS）、脫氧木酮糖-5-磷酸還原異構酶（DXR）及2-甲基赤蘚糖醇-4-焦磷酸合成酶（IspD）是來源于：1）埃希氏菌屬大腸桿菌，或2）來源于其他細菌，優選枯草芽孢桿菌，或3）來源于其他生物中具有相同或相似功能的基因。
4.如權利要求1所述的支架蛋白是起到能使酶分子共區域化的蛋白，包括通過成對的相互作用蛋白質、蛋白結構域和多肽鏈構建的蛋白支架，通過自組裝蛋白質構建的蛋白支架和通過借助化學修飾蛋白構建的蛋白支架等。
5.權利要求1所述的大腸桿菌工程菌株在發酵生產異戊二烯中的應用。
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