[發明專利]一種固定化重組磷脂酶B用于植物油脂脫膠的方法

無效

• 申請號: 201410088073.0
• 申請日: 2014-03-11
• 公開（公告）號: CN103849461A
• 公開（公告）日: 2014-06-11
• 發明（設計）人: 李春;戴大章;梁美麗;黃申
• 申請（專利權）人: 北京理工大學
• 主分類號: C11B3/00
• 分類號: C11B3/00;C12N11/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種固定化重組磷脂酶B用于植物油脂脫膠的方法，其特征在于通過以下步驟實現：一、重組磷脂酶B的固定化：取0.1-10g重組磷脂酶B溶于10-100ml一定pH的檸檬酸/磷酸氫二鈉緩沖液，離心去除雜質，然后加入5-50g?NKA型大孔樹脂，冰浴震蕩吸附一定時間，離心分離，洗滌，冷凍真空干燥，得到固定化的磷脂酶。并確定了固定化酶的最適pH、最適溫度、熱穩定性和操作穩定性的范圍。二、植物油脂脫膠：取植物毛油100g，水浴加熱至80℃，加入一定質量濃度為45%、質量為植物油毛油0.03%-0.15%的檸檬酸溶液，10000rpm均質1min后以500-1000rpm的攪拌速度反應20-40min；冷卻至溫度35-55℃左右，加入質量濃度4%的NaOH溶液至植物毛油的pH值在4.0-6.0之間停止添加NaOH溶液，加入1%-9%的蒸餾水和100U/kg-1000U/kg的固定化重組磷脂酶B加入植物毛油中，100-300rpm攪拌2-7小時，然后對加入固定化重組磷脂酶B的植物油以10000rpm-12000rpm的速度離心5-10min，去除雜質即可。

2.如權利要求1所述的一種固定化重組磷脂酶B用于植物油脂脫膠的方法，其特征在于步驟一中：取0.1-2g重組磷脂酶B溶于10-20ml?pH4.5-7.0的檸檬酸/磷酸氫二鈉緩沖液。

3.如權利要求1所述的一種固定化重組磷脂酶B用于植物油脂脫膠的方法，其特征在于步驟一中：冰浴震蕩吸附時間為3-8h。

4.如權利要求1所述的一種固定化重組磷脂酶B用于植物油脂脫膠的方法，其特征在于步驟二中：涉及的植物油脂為大豆毛油、花生毛油。

5.如權利要求1所述的一種固定化重組磷脂酶B用于植物油脂脫膠的方法，其特征在于步驟二中：向水浴加熱的植物油加入質量為植物油毛油0.06%-0.12%的質量濃度45%檸檬酸溶液10000rpm均質1min后以500-800rpm的攪拌速度反應25-35min。

6.如權利要求1所述的一種固定化重組磷脂酶B用于植物油脂脫膠的方法，其特征在于步驟二中：向預處理的植物毛油中添加質量濃度為4%的NaOH溶液使植物毛油的pH在4.5-5.5之間。

7.如權利要求1所述的一種固定化重組磷脂酶B用于植物油脂脫膠的方法，其特征在于步驟二中：在38-45℃條件下向調整好pH的植物油中加入200U/kg-800U/kg的固定化重組磷脂酶B。

8.如權利要求1所述的一種固定化重組磷脂酶B用于植物油脂脫膠的方法，其特征在于步驟二中：加入固定化酶的植物毛油以150-250rpm的速度攪拌3-6h。