[發(fā)明專利]一種利用24孔板篩選潤(rùn)滑油降解菌的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410085920.8
• 申請(qǐng)日: 2014-03-11
• 公開（公告）號(hào): CN103820522A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姜巖;張賢明;楊穎
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 重慶工商大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/04
• 分類號(hào): C12Q1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.利用24孔板開發(fā)出一種表征微生物降解潤(rùn)滑油能力的方法，來自斜面的菌種經(jīng)2次LB培養(yǎng)基活化后，控制第二次活化的細(xì)胞培養(yǎng)液OD₆₀₀=1.2±0.02，取1mL次級(jí)培養(yǎng)液在6000rpm下離心10min，棄上清液后用1mLpH=7.2的磷酸緩沖溶液重懸、洗滌細(xì)胞，重復(fù)離心、洗滌操作一次后，利用200μL的上述磷酸緩沖液制備成靜止細(xì)胞，將新制備的靜止細(xì)胞作為接種體接種到含2.5mL無機(jī)鹽選擇培養(yǎng)基的24孔板的微孔內(nèi)，再向微孔內(nèi)添加300μL潤(rùn)滑油，制備成菌種生物降解體系，每株菌做3個(gè)平行的微孔實(shí)驗(yàn)，將24孔板置于恒溫培養(yǎng)箱中于37℃恒溫培養(yǎng)6-8天，每天觀察微孔表面油膜變化，以黃色或近黑色油膜中心出現(xiàn)乳白色視為潤(rùn)滑油開始被降解，且中心乳白色區(qū)域由內(nèi)向外逐漸擴(kuò)展?jié)櫥皖伾俗鳛閮?yōu)良菌株的判斷依據(jù)，同時(shí)，用微量移液器吸取2mL細(xì)胞發(fā)酵液利用分光光度計(jì)在600nm波長(zhǎng)下測(cè)其光密度，根據(jù)油膜消退和光密度值評(píng)價(jià)微生物降解潤(rùn)滑油的能力。

2.?權(quán)利要求1請(qǐng)求保護(hù)的技術(shù)方案為菌種降解潤(rùn)滑油能力的評(píng)價(jià)方法。