[發明專利]一種活體腫瘤組織庫的建立方法及其應用

無效

• 申請號: 201410083459.2
• 申請日: 2014-03-07
• 公開（公告）號: CN103815973A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發明（設計）人: 羅杰;湯祥軍;戴龍君;張永;張力;郭新榮;黃寬明;鄒丹丹;曹剛;魯軍體;楊明環;王娜;武高
• 申請（專利權）人: 湖北醫藥學院附屬太和醫院
• 主分類號: A61B19/00
• 分類號: A61B19/00;A61D1/00
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種活體腫瘤組織庫的建立方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）將切取到的目的腫瘤組織預處理；

（2）將所述腫瘤組織移植至小鼠腎臟被膜下；

（3)待腫瘤生長到預定大小后，處死小鼠，在無菌條件下暴露腫瘤，獲取影像資料后切取腫瘤組織，將小鼠身上獲取的部分腫瘤組織分為兩組，其中一組進行冰凍保存；

（4）將另一組腫瘤組織重復步驟（1）和（2）進行活體組織傳代，得到活體腫瘤組織庫；或者將所述冰凍保存的腫瘤組織復蘇后重復步驟（1）和（2）進行活體組織傳代，得到活體腫瘤組織庫。

2.如權利要求1所述的活體腫瘤組織庫的建立方法，其特征在于，在步驟（1）中，所述腫瘤組織預處理包括：將手術切除的人體腫瘤組織立即放在無菌、低溫保存液中，去除可辨認的壞死組織；將腫瘤生長旺盛部位切成1×1×3mm的組織塊。

3.如權利要求2所述的活體腫瘤組織庫的建立方法，其特征在于，所述人體腫瘤為任何人體實體惡性腫瘤，包括肺癌、肝癌、胃癌、食道癌、鼻咽癌、胰腺癌、結腸癌、膀胱癌、腎癌、皮膚癌、甲狀腺癌、膀胱癌、乳腺癌、宮頸癌、卵巢癌、前列腺癌、惡性膠質瘤、骨肉瘤。

4.如權利要求3所述的活體腫瘤組織庫的建立方法，其特征在于，在步驟（2）中，所述小鼠為鼠齡4～5周的SCID小鼠。

5.如權利要求4所述的活體腫瘤組織庫的建立方法，其特征在于，在步驟（2）中，所述移植包括：將小鼠在常規消毒、麻醉條件下暴露左側腎臟，于腎嵴上端用注射針頭挑起腎被膜，剪一個小口，然后用小玻璃棒剝離腎被膜至腎嵴下端，用小鑷子將腫瘤塊放于低端與上端各一塊；最后將腎臟復位、分別縫合肌肉與皮膚、常規復蘇與護理。

6.如權利要求5所述的活體腫瘤組織庫的建立方法，其特征在于，在步驟（3）中，所述冰凍保存包括：將腫瘤組織放在含有1%DMSO的保存液中，以每分鐘降低1度的速度降至-80℃，3小時后轉移到液氮內保存。

7.如權利要求6所述的活體腫瘤組織庫的建立方法，其特征在于，在步驟（4）中，所述腫瘤組織復蘇包括：將冰凍保存的腫瘤組織置于37℃水浴中復蘇。

8.權利要求1至7任一項所述的活體腫瘤組織庫在確定癌癥患者手術后個性化治療方案方面的應用。

9.權利要求1至7任一項所述的活體腫瘤組織庫在抗癌藥物的腫瘤特異性篩選方面的應用。

10.權利要求1至7任一項所述的活體腫瘤組織庫在構建人體癌癥研究的動物模型方面的應用。