[發明專利]利用自制菌液進行布品加速降解的檢測方法及其使用的實驗裝置

有效

• 申請號: 201410082895.8
• 申請日: 2014-03-07
• 公開（公告）號: CN103898187A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: 吳淑煥;嚴玉蓉;張鵬;朱銳鈿;詹志城;王向欽;楊欣卉;張海亮;苗振興
• 申請（專利權）人: 廣州市纖維產品檢測院;華南理工大學
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;C12M1/00
• 代理公司: 廣州三辰專利事務所(普通合伙) 44227
• 代理人: 范欽正

技術領域

本發明及一種布品加速降解的檢測方法及其實驗裝置，具體地說是一種自制菌液進行布品加速降解的檢測實驗及其實驗裝置。?

背景技術

根據GBT?22047-2008,ISO?17556-2003、諸葛健，唐是雯.工業微生物實驗技術手冊[M].中國輕工業出版社：1994和楊汝德，吳虹，林曉珊.現代工業微生物實驗技術[M].科學技術出版社：2009所指導進行菌液加速降解實驗，其實驗的菌液培育緩慢、篩選不精，普通的實驗裝置在進行布品實驗時，實驗裝置內的布品因為沒有被很好的固定，所以加速降解過程中會皺折、卷縮或粘合等，因而對后續檢測的數據會產生一定的影響。?

發明內容

本發明目的提供利用自制菌液進行布品加速降解的檢測方法及其使用的實驗裝置。?

本發明的技術解決方案是具體按照以下步驟實施：?

步驟1，土壤采集；

在所用的天然土壤從田地和/或森林，取離地面5-15cm處土壤表層，或已經預曝置的土壤，用小鏟子除去表土，收集的土約10g，盛入清潔的牛皮紙袋或塑料袋中，扎好，標好，記錄采樣時間、地點、環境條件信息，以備查考；

步驟2，土壤處理；

過篩土壤，以獲得尺寸小于2mm的土壤微粒，并去除明顯的植物材料、石頭和其他惰性材料；將約20克新鮮的泥土去除明顯的雜質物后，至于底部置有脫脂棉的三角形漏斗中，采用去離子蒸餾水200毫升淋洗，對淋洗液采用2000r/min離心后，采用pH計測試其pH?值，三次平行測試結果取均值；

步驟3，Ⅰ代富集；

稱取處理好的土壤樣品10g，加入已裝有90mL營養肉湯的250mL三角瓶里，于37℃士2℃下，150-200r/min，搖床振蕩培養18-24h，得I代土壤細菌混合菌群液；

步驟4，Ⅱ代富集；

用移液器移取1mL第I代混合菌群液到裝有100mL營養肉湯的250mL三角瓶里，于37℃士2℃下，150-200r/min，搖床振蕩培養18-24h，得II代土壤細菌混合菌群液；

步驟5，降解試樣的制備；

從每種樣品上選取有代表性的試樣，裁剪試樣規格：250×50mm，裁剪試樣數量為18件；所有試樣使用前需在115℃下高溫高壓滅菌20min；

步驟6，試樣及試驗液裝進實驗裝置；

準備實驗裝置，洗凈烘干，用封口膜包扎封住實驗裝置，在121℃下高溫高壓滅菌15min，使其在使用前保持無菌狀態；在高溫滅菌過的實驗裝置中各加入試樣15件，同時加入試驗液350mL，封口膜包扎封住實驗裝置開口處，于115℃下滅菌20min，為降解實驗裝置；

步驟7，生物接觸作用；

用移液器移取1mL試驗菌群液加入上述降解實驗裝置，封好實驗裝置開口處；將所有降解實驗裝置置于37℃士2℃下，150-200r/min，搖床振蕩培養18-24h后，常溫下靜置；每3天取樣后置于37℃士2℃下，150-200r/min，搖床振蕩1h，再常溫下靜置；

步驟8，降解過程取樣；

降解過程中，用高溫滅菌的鑷子，將試樣從降解實驗裝置中取出，試樣用蒸餾水沖洗4遍，于40-50℃電熱鼓風干燥箱中干燥后，冰箱保存，以備分析測試；每種試樣每次取3個平行樣，每3天取樣一次；以備降解材料性能參數之測試。

所述營養肉湯為1.5g的MgSO₄，1g的CuSO₄，0.2g的MnSO₄，0.3g的Fe?SO₄·7H₂O，1g的CaCl₂。?

所述營養肉湯為1.5g的K₂HPO₄·3H₂O，1g的KH₂PO₄，0.2g的MgSO₄·7?H₂O，0.5g的NH₄NO₃，0.03g的CaCl₂，0.03g的FeCl₃，0.5L去離子水，pH7.5。?