[發明專利]利用自制菌液進行布品加速降解的檢測方法及其使用的實驗裝置

有效

• 申請號: 201410082895.8
• 申請日: 2014-03-07
• 公開（公告）號: CN103898187A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: 吳淑煥;嚴玉蓉;張鵬;朱銳鈿;詹志城;王向欽;楊欣卉;張海亮;苗振興
• 申請（專利權）人: 廣州市纖維產品檢測院;華南理工大學
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;C12M1/00
• 代理公司: 廣州三辰專利事務所(普通合伙) 44227
• 代理人: 范欽正

1.????利用自制菌液進行布品加速降解的檢測方法，其特征在于，具體按照以下步驟實施：

步驟1，土壤采集；

在所用的天然土壤從田地和/或森林，取離地面5-15cm處土壤表層，或已經預曝置的土壤，用小鏟子除去表土，收集的土約10g，盛入清潔的牛皮紙袋或塑料袋中，扎好，標好，記錄采樣時間、地點、環境條件信息，以備查考；

步驟2，土壤處理；

過篩土壤，以獲得尺寸小于2mm的土壤微粒，并去除明顯的植物材料、石頭和其他惰性材料；將約20克新鮮的泥土去除明顯的雜質物后，置于底部置有脫脂棉的三角形漏斗中，采用去離子蒸餾水200毫升淋洗，對淋洗液采用2000r/min離心后，采用pH計測試其pH?值，三次平行測試結果取均值；

步驟3，Ⅰ代富集；

稱取處理好的土壤樣品10g，加入已裝有90mL營養肉湯的250mL三角瓶里，于37℃士2℃下，150-200r/min，搖床振蕩培養18-24h，得I代土壤細菌混合菌群液；

步驟4，Ⅱ代富集；

用移液器移取1mL第I代混合菌群液到裝有100mL營養肉湯的250mL三角瓶里，于37℃士2℃下，150-200r/min，搖床振蕩培養18-24h，得II代土壤細菌混合菌群液；

步驟5，降解試樣的制備；

從每種樣品上選取有代表性的試樣，裁剪試樣規格：250×50mm，裁剪試樣數量為18件；所有試樣使用前需在115℃下高溫高壓滅菌20min；

步驟6，試樣及試驗液裝進實驗裝置；

準備實驗裝置，洗凈烘干，用封口膜包扎封住實驗裝置，在121℃下高溫高壓滅菌15min，使其在使用前保持無菌狀態；在高溫滅菌過的實驗裝置中各加入試樣15件，同時加入試驗液350mL，封口膜包扎封住實驗裝置開口處，于115℃下滅菌20min，為降解實驗裝置；

步驟7，生物接觸作用；

用移液器移取1mL試驗菌群液加入上述降解實驗裝置，封好實驗裝置開口處；將所有降解實驗裝置置于37℃士2℃下，150-200r/min，搖床振蕩培養18-24h后，常溫下靜置；每3天取樣后置于37℃士2℃下，150-200r/min，搖床振蕩1h，再常溫下靜置；

步驟8，降解過程取樣；

降解過程中，用高溫滅菌的鑷子，將試樣從降解實驗裝置中取出，試樣用蒸餾水沖洗4遍，于40-50℃電熱鼓風干燥箱中干燥后，冰箱保存，以備分析測試；每種試樣每次取3個平行樣，每3天取樣一次；以備降解材料性能參數之測試。

2.根據權利要求1所述的利用自制菌液進行布品加速降解的檢測方法，其特征在于所述營養肉湯為1.5g的MgSO₄，1g的CuSO₄，0.2g的MnSO₄，0.3g的Fe?SO₄·7H₂O，1g的CaCl₂。

3.根據權利要求1所述的利用自制菌液進行布品加速降解的檢測方法，其特征在于所述營養肉湯為1.5g的K₂HPO₄·3H₂O，1g的KH₂PO₄，0.2g的MgSO₄·7?H₂O，0.5g的NH₄NO₃，0.03g的CaCl₂，0.03g的FeCl₃，0.5L去離子水，pH7.5。

4.根據權利要求1所述的利用自制菌液進行布品加速降解的檢測方法，其特征在于所述營養肉湯為1.5g的K₂HPO₄·3H₂O，1g的KH₂PO₄，0.2g的MgSO₄·7?H₂O，0.5g的NH₄NO₃，0.03g的CaCl₂，0.03g的FeCl₃，1g的調和油，10g的瓊脂，0.5L去離子水，pH7.0~7.5。