[發(fā)明專利]人COPB2基因的用途及其相關(guān)藥物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410081471.X
• 申請日: 2014-03-07
• 公開（公告）號: CN104894223B
• 公開（公告）日: 2019-03-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱向瑩;孫琴;高博;張曉慧;金楊晟;瞿紅花;曹躍瓊
• 申請（專利權(quán)）人: 上海吉?jiǎng)P基因化學(xué)技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/113;C12N15/867;C12N7/01;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所(普通合伙) 31219
• 代理人: 張艷

1.能夠特異性抑制COPB2基因的翻譯、或能夠特異性抑制COPB2蛋白的表達(dá)的分子在制備或篩選腫瘤治療藥物中的用途，所述分子為分離的核酸分子，所述核酸分子包含：

a)雙鏈RNA，所述雙鏈RNA為小干擾RNA，所述雙鏈RNA中含有能夠與COPB2基因的靶序列雜交的核苷酸序列；或者

b)shRNA，所述shRNA中含有能夠與COPB2基因的靶序列雜交的核苷酸序列；

所述腫瘤選自結(jié)腸癌；

所述COPB2基因的靶序列選自SEQ ID NO:5。

2.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述雙鏈RNA包含第一鏈和第二鏈，所述第一鏈和所述第二鏈互補(bǔ)共同形成RNA二聚體，并且所述第一鏈的序列與COPB2基因中的靶序列相同；所述shRNA包括正義鏈片段和反義鏈片段，以及連接所述正義鏈片段和反義鏈片段的莖環(huán)結(jié)構(gòu)，所述正義鏈片段和所述反義鏈片段的序列互補(bǔ)，并且所述正義鏈片段的序列與COPB2基因中的靶序列相同。

3.如權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，該小干擾RNA第一鏈的序列如SEQ ID NO：22所示。

4.如權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述shRNA的序列如SEQ ID NO：23所示。

5.降低腫瘤細(xì)胞中COPB2基因表達(dá)的COPB2基因干擾核酸構(gòu)建體、或COPB2基因干擾慢病毒在制備治療結(jié)腸癌的腫瘤治療藥物中的用途，所述COPB2基因的靶序列選自SEQ IDNO:5；

所述COPB2基因干擾核酸構(gòu)建體含有編碼分離的核酸分子中的shRNA的基因片段，能表達(dá)所述shRNA，所述shRNA中含有能夠與COPB2基因雜交的核苷酸序列；

所述COPB2基因干擾慢病毒，由COPB2基因干擾慢病毒載體在慢病毒包裝質(zhì)粒、細(xì)胞系的輔助下，經(jīng)過病毒包裝而成，所述COPB2基因干擾慢病毒載體由將編碼shRNA的基因片段克隆入慢病毒載體后獲得，所述shRNA中含有能夠與COPB2基因雜交的核苷酸序列。

6.如權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于，所述shRNA的序列如SEQ ID NO：23所示。

7.如權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于，所述COPB2基因干擾核酸構(gòu)建體為干擾慢病毒載體。

8.如權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于，所述COPB2基因干擾慢病毒載體由將編碼所述shRNA的基因片段克隆入慢病毒載體后獲得，所述慢病毒載體選自：pLKO.1-puro、pLKO.1-CMV-tGFP、pLKO.1-puro-CMV-tGFP、pLKO.1-CMV-Neo、pLKO.1-Neo、pLKO.1-Neo-CMV-tGFP、pLKO.1-puro-CMV-TagCFP、pLKO.1-puro-CMV-TagYFP、pLKO.1-puro-CMV-TagRFP、pLKO.1-puro-CMV-TagFP635、pLKO.1-puro-UbC-TurboGFP、pLKO.1-puro-UbC-TagFP635、pLKO-puro-IPTG-1xLacO、pLKO-puro-IPTG-3xLacO、pLP1、pLP2、pLP/VSV-G、pENTR/U6、pLenti6/BLOCK-iT-DEST、pLenti6-GW/U6-laminshrna、pcDNA1.2/V5-GW/lacZ、pLenti6.2/N-Lumio/V5-DEST、pGCSIL-GFP或pLenti6.2/N-Lumio/V5-GW/lacZ中的任一。