[發明專利]一種金屬螯合肽的制備方法

有效

• 申請號: 201410078882.3
• 申請日: 2014-03-06
• 公開（公告）號: CN103880920A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: 汪少蕓;黃順麗;趙立娜;邵彪;方衛東;廖蘭
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: C07K5/065
• 分類號: C07K5/065;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/16;C12P21/06
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種金屬螯合肽，其特征在于：所述肽的氨基酸序列為：fd。

2.根據權利要求1所述的一種金屬螯合肽，其特征在于：所述的金屬為Ca、Fe或Zn。

3.一種如權利要求1所述的一種金屬螯合肽的制備方法，其特征在于：以乳清蛋白為原料，采用復合蛋白酶及風味蛋白酶復配對其進行酶解，分離純化、冷凍干燥得到金屬螯合肽。

4.根據權利要求3所述的一種金屬螯合肽的制備方法，其特征在于：所述酶解條件為：底物濃度5%，酶解pH為7.0、溫度49℃、酶解時間為7小時、酶-底物重量配比為1:25。

5.根據權利要求3所述的一種金屬螯合肽的制備方法，其特征在于：所述酶為復合蛋白酶和風味蛋白酶，兩種酶的重量復配比為復合蛋白酶：風味蛋白酶=?2:1。

6.根據權利要求3所述的一種金屬螯合肽的制備方法，其特征在于：所述分離純化的具體步驟為：酶解產物首先利用TOYOPEARL?DEAE-650M陰離子交換色譜進行分離，洗脫液為濃度梯度為含有0-0.5?M?NaCl的0.02?mol/L?pH?9.0的磷酸緩沖液，流速為0.5?mL/min，洗脫峰在214?nm下進行測量；收集具有最高金屬螯合活性的峰，再用Sephadex?G-25凝膠過濾色譜進行分離，洗脫液為去離子水，流速為0.3?mL/min，洗脫峰在214?nm下進行測定；收集具有最高金屬螯合活性的峰，利用半制備RP-HPLC-C18反相高效液相色譜再進行進一步分離，分離條件是用體積比0-30%乙腈溶液作為洗脫液梯度洗脫，流速為4?mL/min，收集具有最高金屬螯合活性的洗脫峰，再利用分析型RP-HPLC-C18反相高效液相色譜再進行進一步分離，洗脫液為體積比0-10%乙腈溶液，流速為1?mL/min，收集洗脫峰，再采用LC/MS液質聯用質譜儀分析得出洗脫峰處為所述金屬螯合肽。