[發明專利]一種乳粉中低聚果糖的高效液相色譜串聯質譜檢測方法

有效

• 申請號: 201410076222.1
• 申請日: 2014-03-04
• 公開（公告）號: CN103823006A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發明（設計）人: 高裕鋒;甄振鵬;郭劍雄;李海喬;余構彬
• 申請（專利權）人: 廣州甘蔗糖業研究所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 廣州市一新專利商標事務所有限公司 44220
• 代理人: 唐弟

1.一種乳粉中低聚果糖的高效液相色譜串聯質譜檢測方法，其特征包括以下步驟：

（1）制備標準溶液并進行高效液相色譜串聯質譜檢測

稱取各種低聚果糖標準品并將其配成混合標準儲備液，再將混合標準儲備液用蒸餾水逐級稀釋，分別配成至少5種不同濃度的混合標準溶液，將不同濃度的混合標準溶液進行高效液相色譜串聯質譜檢測并得到標準譜圖，標準譜圖中保留時間確定低聚果糖品種，色譜峰面積與對應的低聚果糖濃度成函數關系；

（2）將步驟1獲得的標準譜圖按低聚果糖品種分別制作濃度與色譜峰面積關系曲線圖；

（3）乳粉樣品的預處理及高效液相色譜串聯質譜檢測

稱取一定量的乳粉樣品，依次加入蒸餾水和乙醇，渦旋振蕩后，超聲溶解，離心，取上清液稀釋后過濾膜過濾，取濾液進行高效液相色譜串聯質譜檢測，得樣品譜圖；

（4）樣品中的各低聚果糖的含量的確定

將步驟3中獲得的樣品譜圖的保留時間確定低聚果糖品種并將其色譜峰面積與步驟2對應的低聚果糖品種的標準曲線進行比對，用插入法確定樣品中的各低聚果糖的含量。

2.根據權利要求1?所述的乳粉中低聚果糖的檢測方法，其特征在于：步驟1中不同濃度的混合標準溶液濃度從0.5?mg/L至20?mg/L分為6級，級間間隔由小至大大致倍增，每濃度級中各低聚果糖標準品含量相同。

3.根據權利要求1或2?所述的乳粉中低聚果糖的檢測方法，其特征在于，在步驟1和2中高效液相色譜串聯質譜的檢測條件是：

色譜條件：

a)色譜柱：XBridge?TM?Amide，3.5μm，4.6×150mm；

b)進樣量：5~20?μL；

c)柱溫：30~50℃；

d)流速：0.3~0.6?mL/min；

e)流動相和洗脫時間：

流動相A：30/70乙腈/水溶液含0.10%氨水；

流動相B：80/20乙腈/水溶液含0.10%氨水；

洗脫時間0~30?min，流動相A從100%到60%，流動相B從0%到40%；

洗脫時間30~32?min，流動相A保持60%，流動相B保持40%；

洗脫時間32~34min，流動相A從60%到0%，流動相B從40%到100%；

洗脫時間34~35min，流動相A保持0%，流動相B保持100%；

質譜條件：

a)電離模式：負離子（ESI-）；

b)氣簾氣壓力344.5?kPa，碰撞氣壓力中檔，離子噴霧電壓4500V，離子源溫度550℃，霧化氣壓力344.5?kPa，輔助加熱氣壓力344.5?kPa，接口加熱器為開；

c)掃描模式：多反應檢測（MRM）模式。