[發明專利]一種從貝殼類原料中提取麻痹性貝類毒素的方法

在審

• 申請號: 201410072059.1
• 申請日: 2014-02-28
• 公開（公告）號: CN104876939A
• 公開（公告）日: 2015-09-02
• 發明（設計）人: 張松山;哈益明;靳靜;李慶鵬;楊寶路;李詠富;李珍;耿乙文
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院原子能利用研究所
• 主分類號: C07D487/20
• 分類號: C07D487/20
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種從貝殼類原料中提取麻痹性貝類毒素的方法，包括如下步驟：

1）將貝殼類原料與醋酸水溶液混勻至混合物的pH值為2-4后，超聲破碎，再置于沸水中加熱5-10min，冷卻后過濾，收集濾液；

2）將步驟1）所得濾液減壓濃縮后冷凍離心，取上清液用三氯甲烷萃取，取上層萃取液與乙醇混勻后于室溫攪拌20-24小時后，進行第二次離心，收集上清液減壓濃縮后干燥，再用酸化甲醇溶解后過濾，收集濾液干燥后，溶于pH值為2-4的醋酸水溶液后，上樣于凝膠柱進行柱層析，收集保留時間為160min-250min的流分，得到含有所述麻痹性貝類毒素的提取液；

所述酸化甲醇由體積比為2-5：95-98的乙酸和甲醇組成。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟1）中，所述醋酸水溶液的濃度為0.05-0.2M，具體為0.1M；

混合物的pH值為2-3；

超聲破碎步驟中，功率為600-1500W，具體為600W，時間為8-30min，具體為8-10min。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步驟2）冷凍離心步驟中，轉速為4000-6000rpm，具體為4000-5000rpm；離心半徑為4-6cm，具體為5cm；

時間10-12min，具體為10min；

溫度為3-7℃，具體為4℃；

所述第二次離心步驟中，轉速為8000-10000rpm；離心半徑為4-6cm，具體為5cm；時間為8-10min。

4.根據權利要求1-3任一所述的方法，其特征在于：所述步驟2）柱層析步驟中，上樣量為所用凝膠柱體積的2-5%，具體為3-4%；

洗脫劑為pH值為2-4的醋酸水溶液；

洗脫速度為0.4-0.6mL/min，具體為0.5mL/min；

洗脫劑的用量為所用凝膠柱體積的3-5倍，具體為4倍；

所用凝膠柱中，凝膠的型號為Sephadex?G15或Bio-Gel-p-2；

長徑比為30-40：1，具體為30：1；

凝膠柱的長度為60-100cm；直徑為1-5cm，具體為2cm。

5.根據權利要求1-4任一所述的方法，其特征在于：所述貝殼類原料為蝦夷扇貝或華貴櫛孔扇貝。