[發明專利]快速檢測結核桿菌的電化學生物芯片傳感陣列及制備方法在審
| 申請號： | 201410068230.1 | 申請日： | 2014-02-27 |
| 公開（公告）號： | CN104878075A | 公開（公告）日： | 2015-09-02 |
| 發明（設計）人： | 盛尚春;趙朝輝;謝國明;孫廣運;蔡苗;姜雄;逯心敏;雷開鍵;康怡;郭渝 | 申請（專利權）人： | 宜賓市第二人民醫院 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/32 |
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| 地址： | 644000 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 快速 檢測 結核桿菌 電化學 生物芯片 傳感 陣列 制備 方法 | ||
1.一種結核分枝桿菌快速檢測的電化學生物芯片傳感陣列及其制備方法，其特征在于包括以下步驟：
(1)電化學生物芯片傳感陣列Fe3O4SiO2磁性納米復合粒子及納米Au標記的DNA探針生物傳感層的制備；
(2)電化學生物芯片傳感陣列辣根過氧化物酶(HRP)、過氧化氫(H2O2)及納米Au標記的DNA檢測探針構成的級聯檢測信號放大體系的制備。
2.根據權利要求1所述的電化學生物芯片傳感陣列Fe3O4SiO2磁性納米復合粒子標記的DNA探針生物傳感層的制備，其特征在于：
(1)取Fe3O4磁流體，用無水乙醇清洗兩遍，然后用超聲波細胞破碎儀超聲分散均勻，移入三頸燒瓶中，加入氨水，在室溫下以均速攪拌；
(2)向Fe3O4磁流體混合液中逐滴加入適量TEOS反應一定時間，反應后再次用無水乙醇清洗兩遍，再用超純水清洗兩遍，得到的褐色溶液，再用濃鹽酸浸泡該磁流體一周時間，將未被包裹的Fe3O4磁球除去，然后用超純水清洗即Fe3O4SiO2磁性納米復合粒子；
(3)將電化學生物芯片在雙蒸水中清洗兩次，烘干；將液體池覆蓋在電化學生物芯片表面后，一起放入電化學生物芯片反應池中；
(4)分別對應電化學生物芯片的16個反應單元中加入Fe3O4SiO2磁性納米復合粒子修飾的結核分枝桿菌檢測DNA探針，然后將含有電化學生物芯片的反應池放入到充滿氮氣的電化學生物芯片孵育盒中孵育后，取出用無水乙醇輕輕清洗，并在氮氣中烘干；
(5)分別對應電化學生物芯片的16個反應單元中加入結核分枝桿菌標本預處理混合液后放入電化學生物芯片孵育盒中。
3.根據權利要求1所述的化學生物芯片傳感器陣列辣根過氧化物酶(HRP)、過氧化氫(H2O2)、四甲基聯苯安(TMB)及納米Au標記的結核分枝桿菌DNA檢測探針構成的級聯檢測信號放大體系的制備，其特征在于：
(1)分別對應電化學生物芯片的16個反應單元中加入納米Au標記的結核分枝桿菌DNA檢測探針，孵育后取出用PBS輕輕沖洗；
(2)分別對應電化學生物芯片的16個反應單元中加入辣根過氧化物酶(HRP)、過氧化氫(H2O2)、四甲基聯苯安(TMB)，通過顯色反應肉眼觀測顯色結果。
4.根據權利要求1所述的電化學生物芯片檢測大腸桿菌標準曲線的繪制，其特征在于：通過差分脈沖電流圖和電流時間曲線圖統計數據，根據所檢測不同濃度的結核分枝桿菌繪制標準曲線。
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