[發(fā)明專利]一種損傷DNA-納米金復合物及其制備方法與應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410067262.X | 申請日： | 2014-02-26 |
| 公開（公告）號： | CN104861037A | 公開（公告）日： | 2015-08-26 |
| 發(fā)明（設計）人： | 汪福意;杜支鳳;羅群;郭偉 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國科學院化學研究所 |
| 主分類號： | C07K1/14 | 分類號： | C07K1/14;G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京潤平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11283 | 代理人： | 李婉婉;張苗 |
| 地址： | 100190 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 損傷 dna 納米 復合物 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種損傷DNA-納米金復合物，其特征在于，該損傷DNA-納米金復合物中，1摩爾的納米金上結(jié)合有7-12摩爾的藥物損傷的雙鏈DNA。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的損傷DNA-納米金復合物，其中，所述藥物損傷的雙鏈DNA的長度為9-45bp，結(jié)合藥物的DNA鏈中間具有1-2個鳥嘌呤。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的損傷DNA-納米金復合物，其中，所述藥物為鉑類抗腫瘤藥物，所述鉑類抗腫瘤藥物的通式優(yōu)選為[Pt(Ⅱ)A2X2]，其中，A2為2個單齒氨配體或1個雙齒氨配體，更優(yōu)選為NH3或NH2C2H4NH2；X2為2個單齒陰離子配體或一個雙齒陰離子配體，更優(yōu)選地，單齒陰離子配體為Cl。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的損傷DNA-納米金復合物，其中，所述納米金的平均粒徑為10-40nm。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項所述的損傷DNA-納米金復合物，其中，所述藥物損傷的雙鏈DNA與納米金通過S-Au鍵相連。
6.制備權(quán)利要求1-5中任意一項所述的損傷DNA-納米金復合物的方法，其特征在于，該方法包括將藥物損傷的雙鏈DNA與納米金接觸，以使藥物損傷的雙鏈DNA與納米金相連。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中，在接觸體系中，藥物損傷的雙鏈DNA和納米金的摩爾比為250-500:1。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中，所述接觸的方式為：在25-38℃下孵育1-2.5h，加入氯化鈉并使氯化鈉在接觸體系中的終濃度為0.05-0.15M，再于3-5℃下靜置10-15h。
9.權(quán)利要求6-8中任意一項所述的方法制得的損傷DNA-納米金復合物。
10.一種捕獲藥物損傷DNA應答蛋白的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：
（1）將權(quán)利要求1-5和9中任意一項所述的損傷DNA-納米金復合物、沒有被藥物損傷的對照DNA-納米金復合物與細胞裂解液混合，以使損傷DNA-納米金復合物與藥物損傷DNA應答蛋白結(jié)合，所述對照DNA-納米金復合物中，1摩爾的納米金上結(jié)合有7-12摩爾的雙鏈DNA，所述對照DNA-納米金復合物中的雙鏈DNA與所述損傷DNA-納米金復合物中的藥物損傷的雙鏈DNA的堿基序列相同；
（2）除去未結(jié)合的蛋白，從而分離出捕獲的蛋白；
（3）鑒定捕獲的蛋白；
（4）應用基于穩(wěn)定同位素標記的定量蛋白質(zhì)組學方法對捕獲的蛋白進行定量比較，排除非特異性的DNA結(jié)合蛋白，從而得到特異性識別藥物損傷DNA的應答蛋白。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中，以納米金的重量計，所述損傷DNA-納米金復合物與細胞裂解液中總蛋白的重量比為0.2-0.4:1。
12.權(quán)利要求1-5和9中任意一項所述的損傷DNA-納米金復合物在藥物損傷DNA應答蛋白的捕獲和/或鑒定中的應用。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于中國科學院化學研究所，未經(jīng)中國科學院化學研究所許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201410067262.X/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
