[發(fā)明專利]基于dCAPS技術(shù)對日本看麥娘抗藥性相關(guān)突變的分子檢測方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410066925.6 | 申請日: | 2014-02-27 |
| 公開(公告)號: | CN103882121A | 公開(公告)日: | 2014-06-25 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 董立堯;徐洪樂;李俊;潘浪 | 申請(專利權(quán))人: | 南京農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 210095 江蘇省南*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 基于 dcaps 技術(shù) 日本 看麥娘 抗藥性 相關(guān) 突變 分子 檢測 方法 | ||
1.一種快速準(zhǔn)確檢測抗ACCase抑制劑類除草劑的日本看麥娘、看麥娘、菵草等雜草中與抗性相關(guān)的突變位點(diǎn)(Ile-1781-Leu,Trp-1999-Cys,Trp-1999-Leu,Trp-2027-Cys,Ile-2041-Asn,Asp-2078-Gly)的分子檢測方法,其特征是基于衍生酶切擴(kuò)增多態(tài)性(dCAPS)技術(shù)對抗性相關(guān)突變的檢測,該方法包括以下步驟:
步驟1:提取雜草DNA樣本;
步驟2:進(jìn)行PCR;
步驟3:用限制性內(nèi)切酶酶切PCR產(chǎn)物;
步驟4:瓊脂糖凝膠電泳檢測酶切產(chǎn)物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分子檢測方法,其特征在于:
(1)步驟2中所述的用于PCR反應(yīng)中的引物具有特異性,所述的引物分別為:
(2)步驟3中用于酶切的限制性內(nèi)切酶具有特異性,所述的內(nèi)切酶分別為:
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的分子檢測方法,所述雜草可以是日本看麥娘、看麥娘、菵草、棒頭草、硬草等禾本科雜草。
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