[發明專利]H9亞型禽流感病毒和鴨坦布蘇病毒二重RT-PCR檢測試劑盒有效
| 申請號： | 201410066408.9 | 申請日： | 2014-02-26 |
| 公開（公告）號： | CN103789454A | 公開（公告）日： | 2014-05-14 |
| 發明（設計）人： | 謝芝勛;趙虹;謝麗基;劉加波;范晴;龐耀珊;羅思思;鄧顯文;謝志勤 | 申請（專利權）人： | 廣西壯族自治區獸醫研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104 | 代理人： | 楊立華 |
| 地址： | 530001 廣西壯族*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | h9 禽流感 病毒 鴨坦布蘇 二重 rt pcr 檢測 試劑盒 | ||
1.H9亞型禽流感病毒和鴨坦布蘇病毒二重RT-PCR檢測引物組，其特征在于包括兩對特異性引物，分別是引物1和2、引物3和4，它們分別具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.4的堿基序列。
2.根據權利要求1所述的H9亞型禽流感病毒和鴨坦布蘇病毒二重RT-PCR檢測引物組，其特征在于：所述引物1、引物2、引物3、引物4的摩爾比為0.5-1∶0.5-1∶1∶1。
3.根據權利要求2所述的H9亞型禽流感病毒和鴨坦布蘇病毒二重RT-PCR檢測引物組，其特征在于：所述引物1、引物2、引物3、引物4的摩爾比為1∶1∶1∶1。
4.權利要求1所述H9亞型禽流感病毒和鴨坦布蘇病毒二重RT-PCR檢測引物組在二重PCR擴增方面的應用，其特征在于：所述二重PCR擴增的退火溫度為50.0-60.1℃。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于：所述二重PCR擴增的退火溫度為54.5℃。
6.一種H9亞型禽流感病毒和鴨坦布蘇病毒二重RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于該試劑盒含有以下試劑：
A液：PCR反應液，含2×Taq?PCR?Mix(購自全式金.AS111-12)、H9AIV上下游引物、TMUV上下游引物、ddH2O，H9AIV上下游引物分別是引物1和2，TMUV上下游引物分別是引物3和4，引物1至4分別具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.4的堿基序列；
B液：H9AIV+TMUV模板，作為陽性對照；
C液：ddH2O，作為陰性對照。
7.根據權利要求6所述的H9亞型禽流感病毒和鴨坦布蘇病毒二重RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于：所述PCR反應液含2×Taq?PCR?Mix25μL、H9AIV上下游引物各0.8μl、TMUV上下游引物各1.2μl、ddH2O1.0μL，其中各引物濃度均為50μmol/mL；所述B液含H9AIV+TMUV模板各10μL，所述C液為2μL?ddH2O。
8.權利要求7所述H9亞型禽流感病毒和鴨坦布蘇病毒二重RT-PCR檢測試劑盒在二重PCR擴增方面的應用，其特征在于：所述二重PCR擴增的退火溫度為50.0-60.1℃。
9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于：所述二重PCR擴增的退火溫度為54.5℃。
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