[發(fā)明專利]絲素蛋白單組分微囊、絲素蛋白-納米金雜化微囊及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410066374.3
• 申請日: 2014-02-26
• 公開（公告）號: CN103768038A
• 公開（公告）日: 2014-05-07
• 發(fā)明（設計）人: 張其清;杜博;周志敏
• 申請（專利權）人: 中國醫(yī)學科學院生物醫(yī)學工程研究所
• 主分類號: A61K9/50
• 分類號: A61K9/50;A61K47/42;A61K47/02;A61K49/00
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 陸藝

技術領域

本發(fā)明屬于藥物載體領域，具體地涉及一種絲素蛋白單組分微囊及其制備方法，一種絲素蛋白-納米金雜化微囊及其制備方法

背景技術

在藥物傳遞系統(tǒng)（drug?delivery?systems）中，中空結(jié)構的有機或無機載體由于其特殊的包封、保護以及傳遞特性而受到了廣泛關注。目前，常見的中空微/納米粒子主要包括聚電解質(zhì)微囊、聚合物空心微/納米球、脂質(zhì)體、碳管及硅基微粒等，其制備方法也各不相同。其中，層層自組裝（Layer-by-layer,LBL）技術由于其簡便易行、適用性強等優(yōu)勢而在中空微囊制備中備受重視。然而，LBL法在制備醫(yī)用中空微囊時也具有其自身的不足，如荷正電的聚電解質(zhì)引入的潛在生物毒性；無機模板去除時常須使用強腐蝕性酸如氫氟酸、鹽酸等；不可降解聚合物如聚苯乙烯球模板的殘留等。基于上述不足，2011年，Tsukruk小組利用蛋白變性原理，制備了單組份LBL絲素蛋白微囊，通過控制絲素蛋白沉積的層數(shù)調(diào)控微囊通透性，避免了荷正電聚電解質(zhì)帶來的生物毒性（Shchepelina,O.;Drachuk,I.;Gupta,M.K.;Lin,J.;Tsukruk,V.V.,Adv.Mater.2011,23,4655-4660.）。而基于聚乳酸（PLA）或聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）微球模板的LBL微囊無疑克服了無機酸苛刻的模板去除條件，同時由于PLA和PLGA良好的生物相容性也解決了模板殘留問題（Shenoy,D.B.;Antipov,A.A.;Sukhorukov?G.B.;H.Biomacromolecules2003,4,265-272.）。但是，LBL法仍無法克服其操作費時及產(chǎn)量隨殼層層數(shù)的增加而減少的難題，大大限制了傳統(tǒng)LBL法實際工業(yè)應用價值（Richardson,J.J.;Liang,K.;Kempe,K.;Ejima,H.;Cui,J.;Caruso,F.Adv.Mater.2013,25,6874-6878.Zhu,Y.;Tong,W.;Gao,C.;Mohwald,H.J.Mater.Chem.2008,18,1153-1158）。因而，一步法合成聚電解質(zhì)微囊得到了初步探索，如以介孔氧化硅或MnCO₃微粒為模板合成聚合物或天然蛋白單組分微囊，并通過條件優(yōu)化調(diào)控了微囊的通透性。（Wang,Y.;Bansal,V.;Zelikin,A.N.;Caruso,F.,Nano?Lett.2008,8,1741-1745.Zhu,Y.;Tong,W.;Gao,C.;Mohwald,H.,J.Mater.Chem.2008,18,1153-1158.）。然而，將方法溫和簡便普適性、模板生物相容性、微囊通透性以及多功能性集于一體的微囊類納米器件及其制備方法還未見報道。

PLGA是一種具有良好生物相容性和生物降解性的醫(yī)用高分子材料，經(jīng)美國FDA批準可用作醫(yī)用手術縫合線、微膠囊、微球等器械和藥用輔料。PLGA在體內(nèi)中間產(chǎn)物是乳酸，是人機體正常的代謝產(chǎn)物，不會在重要器官聚集，最終代謝產(chǎn)物是CO₂和H₂O。以PLGA微粒作為微囊制備的模板，不僅可解決模板殘留問題，而且去除PLGA模板的過程也相對簡便溫和。絲素蛋白具有卓越的機械強度、良好的生物相容性以及可加工性并且不易引發(fā)炎癥反應，是藥物載體的理想材料。金是極其惰性的材料，金納米粒子理化性質(zhì)穩(wěn)定、環(huán)境友好、生物相容性好、半數(shù)致死量高，并具有優(yōu)異的光學性質(zhì)，通過物理吸附或-SH、-S-SH、-NH₂等共價鍵合可穩(wěn)定地固定多種生物分子，如核酸、抗體及藥物等，并保持其生物活性。

因此，以PLGA微粒為模板，利用去溶劑法一步合成絲素蛋白單組份微囊，進而利用DNA功能化的納米金進行微囊表面修飾，在調(diào)控其通透性的同時賦予微囊無機納米粒子引入的特殊光學性質(zhì)以及DNA的多種生物學功能，使該類雜化微囊兼具藥物傳遞及診斷的功能還未見報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種絲素蛋白單組分微囊。

本發(fā)明的第二個目的是提供一種絲素蛋白單組分微囊的制備方法。

本發(fā)明的第三個目的是提供一種絲素蛋白-納米金雜化微囊。

本發(fā)明的第四個目的是提供一種絲素蛋白-納米金雜化微囊的制備方法。

本發(fā)明的第五個目的是提供一種絲素蛋白-納米金雜化微囊的用途。

本發(fā)明的技術方案概述如下：

一種絲素蛋白單組分微囊的制備方法，包括的步驟：