[發明專利]H10亞型禽流感病毒RT-LAMP可視化檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201410066340.4
• 申請日: 2014-02-26
• 公開（公告）號: CN103820577A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發明（設計）人: 謝芝勛;羅思思;劉加波;龐耀珊;鄧顯文;謝志勤;謝麗基;范晴
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區獸醫研究所
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.檢測H10亞型禽流感病毒的環介導等溫擴增引物組，為引物組A或引物組B；所述引物組A由引物1、引物2、引物3、引物4、引物5和引物6組成；所述引物組B由所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4組成；

所述引物1、所述引物2、所述引物3、所述引物4、所述引物5和所述引物6的核苷酸序列分別為序列表中的序列1、序列2、序列3、序列4、序列5和序列6。

2.根據權利要求1所述的引物組，其特征在于：所述引物組A中所述引物1、所述引物2、所述引物3、所述引物4、所述引物5和所述引物6的摩爾比為8：8：1：1：4：4；所述引物組B中所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4的摩爾比為8：8：1：1。

3.檢測H10亞型禽流感病毒的逆轉錄環介導等溫擴增試劑，包括鏈置換型DNA聚合酶、甜菜堿、dNTPs、Mg²⁺、反轉錄酶和權利要求1或2所述的引物組。

4.根據權利要求3所述的試劑，其特征在于：所述引物1、所述引物2、所述引物3、所述引物4、所述引物5、所述引物6、所述dNTPs、所述Mg²⁺、所述鏈置換型DNA聚合酶、所述反轉錄酶和所述甜菜堿在所述擴增試劑中的配比為40pmol：40pmol：5pmol：5pmol：20pmol：20pmol：35nmol：125nmol：8U：5U：20μmol；或

所述引物1、所述引物2、所述引物3、所述引物4、所述dNTPs、所述Mg²⁺、所述鏈置換型DNA聚合酶、所述反轉錄酶和所述甜菜堿在所述擴增試劑中的配比為40pmol：40pmol：5pmol：5pmol：35nmol：125nmol：8U：5U：20μmol。

5.根據權利要求3或4所述的試劑，其特征在于：所述鏈置換型DNA聚合酶為Bst?DNA聚合酶大片段或Bst?DNA聚合酶。

6.根據權利要求3-5中任一所述的試劑，其特征在于：所述反轉錄酶為AMV反轉錄酶。

7.根據權利要求3-6中任一所述的試劑，其特征在于：所述試劑還包括熒光顯色劑。

8.根據權利要求7所述的試劑，其特征在于：所述熒光顯色劑為含有鈣黃綠素和MnCl₂的水溶液；

所述熒光顯色劑中，所述鈣黃綠素和所述MnCl₂的配比為50μmol：1mmol。

9.檢測H10亞型禽流感病毒的逆轉錄環介導等溫擴增試劑盒，其特征在于：所述試劑盒含有權利要求1或2所述引物組，或權利要求3-8中任一所述的試劑。

10.如下a）或b）的應用：

a）權利要求1或2所述的引物組在制備權利要求3-8中任一所述試劑或權利要求9所述試劑盒中的應用；

b）權利要求1或2所述的引物組，或權利要求3-8中任一所述的試劑，或權利要求9所述的試劑盒在制備檢測或輔助檢測待測樣品中是否含有H10亞型禽流感病毒的產品中的應用。