[發明專利]基于納米磁珠的核酸提取純化方法及試劑盒

有效

• 申請號: 201410062784.0
• 申請日: 2014-02-25
• 公開（公告）號: CN103820431A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發明（設計）人: 李明;李紅東;苗保剛;彭年才;倪曉龍;李政
• 申請（專利權）人: 蘇州天隆生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 蘇州慧通知識產權代理事務所(普通合伙) 32239
• 代理人: 安紀平

1.一種基于納米磁珠的核酸提取純化方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)在生物樣品中加入裂解緩沖液，裂解分離出所述生物樣品中的核酸DNA/RNA，所述核酸DNA/RNA與所述裂解緩沖液中的納米磁珠結合，在外部磁場作用下，形成磁珠-核酸復合物；

2)向所述磁珠-核酸復合物中加入洗滌緩沖液，洗滌去除磁珠-核酸復合物上的雜質，在外部磁場作用下，收集洗滌后的磁珠-核酸復合物；

3)向所述洗滌后的磁珠-核酸復合物中加入洗脫緩沖液，將結合在納米磁珠上的核酸DNA/RNA洗脫下來回收，即得到純化的核酸DNA/RNA。

2.根據權利要求1所述的基于納米磁珠的核酸提取純化方法，其特征在于，所述裂解緩沖液包括：碘化鈉1.5～3M，鹽酸胍2～3M，EDTA1～10mM，Tween-203％，納米磁珠8％，SDS2％，異丙醇35％，所述裂解緩沖液的PH值＝7.4；

所述洗滌緩沖液包括：EDTA1～10mM，Tris-cl150mM，乙醇75％，所述洗滌緩沖液的PH值＝6.4；

所述洗脫緩沖液采用1mM氫氧化鈉液。

3.根據權利要求1所述的基于納米磁珠的核酸提取純化方法，其特征在于，所述生物樣品包括有細胞液體樣品和無細胞液體樣品。

4.根據權利要求3所述的基于納米磁珠的核酸提取純化方法，其特征在于，所述有細胞液體樣品包括細胞、全血、動物組織勻漿液。

5.根據權利要求3所述的基于納米磁珠的核酸提取純化方法，其特征在于，所述無細胞液體樣品包括血清、血漿、組織提取液、拭子洗液、尿液、病毒培養液。

6.根據權利要求1或2所述的基于納米磁珠的核酸提取純化方法，其特征在于，所述納米磁珠為超順磁性氧化硅納米磁性微珠，直徑為100√800nm。

7.一種基于納米磁珠的核酸提取純化試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中的組分包括裂解緩沖液、洗滌緩沖液和洗脫緩沖液，所述裂解緩沖液包括：碘化鈉1.5～3M，鹽酸胍2～3M，EDTA1～10mM，Tween-203％，納米磁珠8％，SDS2％，異丙醇35％；所述洗滌緩沖液包括：EDTA1～10mM，Tris-cl150mM，乙醇75％；所述洗脫緩沖液采用1mM氫氧化鈉液。

8.根據權利要求7所述的基于納米磁珠的核酸提取純化方法，其特征在于，所述裂解緩沖液的PH值＝7.4。

9.根據權利要求7所述的基于納米磁珠的核酸提取純化方法，其特征在于，所述洗滌緩沖液的PH值＝6.4。