[發明專利]使用最適化的低鹽培養基培養破囊壺菌屬微生物的方法

無效

• 申請號: 201410052133.3
• 申請日: 2004-11-10
• 公開（公告）號: CN104073442A
• 公開（公告）日: 2014-10-01
• 發明（設計）人: 馬西亞斯·魯辛;馬爾庫什·盧伊
• 申請（專利權）人: 努特諾瓦營養產品及食品成分有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P7/64;A23K1/16;A23D9/00
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司 11219
• 代理人: 張穎;謝麗娜

本申請是申請日為2004年11月10日、中國國家申請號為200480035832.1、發明名稱為“使用最適化的低鹽培養基培養Thraustochytriales屬微生物的方法”申請的分案申請。?

各種不同的PUFAs(多不飽和脂肪酸)，特別是ω-3脂肪酸(n-3脂肪酸)是人類營養的必需成分。?

然而，已知在大多數工業化國家中，n-3脂肪酸的供給是不足的。與此相反，飲食中的總脂肪比例，以及飽和脂肪酸和n-6脂肪酸的攝入太高。這是由于我們的飲食結構發生的變化，特別是在最近的大約150年間發生的變化所引起的，并與各種不同的文明化所帶來的慢性病，例如工業化國家主要的死亡原因——心血管疾病的出現相關聯(Simopoulos,A.P.,1999,Am.J.Clin.Nutr.70,560-569)。同時，大量的研究顯示，通過定向地增加n-3脂肪酸，特別是二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的攝入，有可能顯著降低心血管病的風險(GISSI-Prevenzione研究人員(Gruppo?Italiano?per?lo?Studio?della?Sopravvivenza?nell′Infarto?miocardico),1999,在心肌梗塞后通過飲食補充n-3多不飽和脂肪酸和維生素E：GISSI-prevenzione試驗的結果，Lancet354,447-455；Burr等,1989,脂肪、魚類和纖維攝取量的變化對死亡和心肌梗塞的影響：飲食和再次梗塞試驗(DART)，Lancet2,757-761)。因此，許多不同的組織(WHO、FAO、AHA、ISSFAL、不列顛營養基金會等)推薦大量增加n-3脂肪酸的攝入量(Kris-Eherton等，魚類消費量、魚油、ω-3脂肪酸和心血管疾病，Circulation2002,2747-2757)。?

生產PUFAs以及特別是n-3脂肪酸的源泉為上述所有的海洋冷水魚類以及從它們中提取的油，此外還為海洋微生物，這些海洋微生物?與魚類相比的優勢在于，它們可在成本效應和受控條件下進行發酵以生產PUFAs。發酵生產不存在任何污染的危險，而對于魚類或從其中提取的魚油來說卻經常被描述發生這樣的問題(Olsen?SF.Int?J?Epidemiol.2001:1279-80)。此外，提取的魚油的成分必然會受到對魚的種類和培養條件的選擇的影響，而不易受到季節變化的影響，正如對于魚類和魚產品所描述的那樣(Gamez-Meza?et?al.Lipids1999:639-42)。?

已經發現了許多適合于生產n-3PUFA的微生物，例如弧菌(Vibrio)屬的細菌(例如海產弧菌(Vibrio?marinus))或甲藻(Dinophyta)，特別是隱甲藻(Crypthecodinium)屬中的微生物例如寇氏隱甲藻(C.cohnii)，或原生藻菌例如Pinguiophyceae中的微生物例如Glossomastix、Phaeomonas、Pinguiochrysis、Pinguiococcus和Polydochrysis。優選的用于發酵生產PUFA的微生物屬于Stramenopiles(或Labyrinthulomycota)，特別是Thraustochytriales目(Thraustchytriidea)中的微生物，又特別是Japonochytrium、裂壺菌(Schizochytrium)、破囊壺菌(Thraustochytrium)、Althornia、Labyrinthuloides、Aplanochytrium和Ulkenia屬中的微生物。?

已經知道一些上面提到的微生物可以用于工業化生產脂肪酸，相應的工藝方法已經被描述。因此，國際專利申請WO?91/07498?A1公開了使用破囊壺菌和裂壺菌屬的生物體來生產PUFAs。WO?91/11918?A1公開了使用寇氏隱甲藻(Crypthecodinium?cohnii)生產PUFAs，WO96/33263?A1和相應的歐洲專利申請EP?0?823?475?A1描述了使用裂壺菌屬的微生物生產PUFAs，而專利申請WO?98/03671公開了使用Ulkenia屬的微生物生產PUFAs。?