[發明專利]多聚化學發光標記試劑及其制備方法與應用

無效

• 申請號: 201410050951.X
• 申請日: 2014-02-14
• 公開（公告）號: CN103792346A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 劉澗泉;黃炳河
• 申請（專利權）人: 赫利森（廈門）生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/533
• 分類號: G01N33/533;G01N21/76
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所(普通合伙) 35200
• 代理人: 馬應森

1.多聚化學發光標記試劑，其特征在于其原料組成如下：

a)化學發光標記物；

b)多聚物骨架；

c)配體、受體或官能團。

2.如權利要求1所述多聚化學發光標記試劑，其特征在于所述化學發光標記物為任何通過吸收化學能而發光的標記物，選自：

a）吖啶酮系列，所述吖啶酮系列選自吖啶酯及其衍生物，包括磺基化的吖啶酯,APS-5（9-(4-chlorophenylthiophosphoryl-oxymethylidene)-10-methylacridan）及其衍生物；

b）酰肼系列，所述酰肼系列選自魯米諾、異魯米諾、魯米諾相關的酰肼或環酰肼；

c）苯多酚系列，所述苯多酚系列選自鄰苯三酚、間苯三酚或間苯二酚；

d)金剛烷系列，所述金剛烷系列選自3-（2-螺旋金剛烷-4-甲氧基-4-甲基-4-（3-磷酸氧基）-苯基-1，2-二氧乙烷；

e）其它系列，所述其它系列選自過氧草酸酯、光澤精或洛粉堿；

f）能量轉移類發光標記物，所述能量轉移類發光標記物選自能量轉移類的魯米諾衍生物，所述能量轉移類的魯米諾衍生物選自魯米諾-吖啶酮共軛體；或魯米諾-熒光素共軛體；或魯米諾-羅丹明共軛體；其中，吖啶酮、熒光素、羅丹明是能量受體，其它能量受體可同樣被采用。

3.如權利要求1所述多聚化學發光標記試劑，其特征在于所述多聚物骨架選自：

1）含有多個供化學發光標記修飾的官能團的人造多聚物或天然多聚物，選自葡聚糖、瓊脂糖、纖維素、聚乙烯亞胺、聚丙烯酸及其衍生物、樹狀納米微球、聚賴氨酸、牛血清白蛋白、人血清白蛋白或其它蛋白質或多肽；

2）特殊化學修飾的核酸，所述特殊化學修飾的核酸，在核苷酸糖環、磷酸基或堿基上通過化學修飾引入吖啶酯或異魯米諾，優選樹狀DNA。

4.如權利要求1所述多聚化學發光標記試劑，其特征在于所述配體是相互間具有特異性作用配對中的一方，所述配體為抗原-抗體、配體-受體、DNA堿基配對或RNA堿基配對、底物-酶、配體-蛋白；所述配體可選自生物配體包括生物素、亞氨基生物素、唾液酸、葉酸、凝集素、伴刀豆凝集素A、鈣調素、肝素、抗原、精氨酸、賴氨酸、谷胱甘肽、谷胱甘肽-S-轉移酶、地高辛、透明質酸、苯硼酸、明膠、磷酸腺苷、二磷酸腺苷、三磷酸腺苷、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸、苯甲脒、汽巴隆藍、普施安紅、DNA片段、RNA片段、荷爾蒙多肽、激素、熒光素中的一種。

5.如權利要求1所述多聚化學發光標記試劑，其特征在于所述受體是相互間具有特異性作用配對中的另一方，所述受體選自鏈霉親和素、抗生物素蛋白、NutraAvidin、抗體、G蛋白偶聯受體及其它細胞表面受體、生物酶中的一種；所述抗體可選自熒光素-抗熒光素抗體或地高辛-抗地高辛抗體。

6.如權利要求1所述多聚化學發光標記試劑，其特征在于所述官能團是可用來修飾抗體或DNA或其它生物分子的化學基團，所述官能團選自醛基、氨基、羧基、巰基、炔基、疊氮、氧氨、肼、α-鹵代羧基、異氰酸酯、異硫氰酸酯、N-羥基琥珀酯、環氧化物、環氧乙烷、氮丙啶、馬來酰亞胺、乙烯砜、硅醇基、螯合劑中的一種。

7.如權利要求1所述多聚化學發光標記試劑，其特征在于所述官能團選自生物共軛反應配對中的一個：

a）甲酰基苯甲酸N-羥基琥珀酰亞胺酯或2,5-二氧吡咯烷-1-基-6-(2-(丙-2-亞基)肼基)煙酸；

b）SMCC（4-(Maleimidomethyl)cyclohexanecarboxylic?acid)或巰基；

c）點擊化學配對；

d）原生化學鏈接（Native?Chemical?Ligation）配對；

e）狄爾斯-阿爾德反應（Diels-Alder?Reaction）配對。