[發明專利]一種酶解法快速提取魚膠原蛋白的方法

無效

• 申請號: 201410050681.2
• 申請日: 2014-02-14
• 公開（公告）號: CN103789382A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 鐘春燕;鐘宇光
• 申請（專利權）人: 鐘春燕
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物制品制備技術領域，特別涉及一種酶解法快速提取魚膠原蛋白的方法。

背景技術

膠原蛋白是結締組織中一種具有豐富生理功能的重要結構蛋白，它具有的獨特的大分子螺旋結構和聚集態結構，使其具有一定的熱穩定性和很高的機械韌性和強度，賦予了它用于食品、醫藥品、包裝材料的獨特之處。膠原蛋白具有很強的親水、保濕性能，其在食品中可用作添加劑，以改善食品的風味、提高食品的保藏穩定期，可用作食品的膠凝劑、穩定劑、乳化劑、增稠劑、發泡劑、粘合劑、澄清劑等。膠原蛋白作為天然的生物資源，目前在食品、醫藥、化妝品、營養保健品等高附加值工業中的應用越來越廣泛，越來越受到人們的重視。膠原蛋白所特有的極低的抗原性、極高的可生物降解性、生物吸收性、止血功能和促進細胞生長的功能，近幾年來在醫藥工業、臨床醫學和臨床治療中也有廣泛的應用。根據臨床要求的不同，對膠原進行相應的加工處理，可制備成膠原注射液、膠原止血粉劑、止血纖維、止血海綿、手術縫合材料、心臟瓣膜修復材料，外科敷料、皮膚移植材料，以及以管狀形式的血管、食管和氣管的替代材料等。這些材料被廣泛用于創傷和燒傷的修復、整形和美容，皮膚及神經生長，以及血管、瓣膜手術等，展現出良好的應用前景。

傳統的膠原蛋白提取方法是從豬、牛的皮和骨，以及禽類組織中提取。但近年來因瘋牛病、口蹄疫、禽流感等疾病的爆發，使人們對牲畜與禽類膠原制品安全性產生疑慮。另外，由于宗教和習俗等原因，從豬皮牛皮中提取膠原蛋白受到很大限制，因此，尋找膠原蛋白的新來源顯得愈來愈迫切。從海水或淡水魚體廢棄物提取安全性高、吸收率高、生物活性更強的膠原蛋白將成為膠原蛋白產品提取的主要來源。

現有的魚膠原蛋白提取方法在前期處理時往往忽略了魚體廢棄物中脂肪的去除問題，使脂肪混入膠原蛋白中影響膠原蛋白的純度，并制約了其在下游領域的應用。此外，脂肪脫除方法一般采用酸、堿溶液或有機溶劑法，這些方法不但成本較高，脫脂不徹底，且化學試劑的使用容易使膠原蛋白變性，降低產品得率。傳統的膠原蛋白提取方法采用酸或堿降解膠原蛋白提取，這些方法會在降解過程中導致部分氨基酸破壞，產品安全性差，生物活性損失，生產中的廢液對環境造成污染；采用低溫生物酶解技術，不添加其他物質，可以提高產品品質（如CN102533914?A），避免環境污染，但所需時間較長，產品分子量較低，且得到的膠原蛋白分子量分布不均。?

為了加快魚膠原蛋白的生產周期，降低生產成本，制備能夠滿足不同分子量需要的魚膠原蛋白。本專利采用高壓超聲酶解技，一步完成脫脂處理和蛋白提取，大大提高了提取效率，縮短了生產時間。提取過程綠色環保，快速方便，魚膠原蛋白分子量分布均勻，雜質少，可作為原材料應用于營養保健品、化妝品、食品及醫用領域。

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發明內容

本發明的目的是提供一種酶解法快速提取魚膠原蛋白的方法。本發明的制備過程簡單易行、操作方便、成本低，制備的魚膠原蛋白分子量分布均勻，雜質少，可作滿足營養保健品、化妝品、食品及醫用等應用領域對不同分子量魚膠原蛋白的需求。

本發明的公開了一種酶解法快速提取魚膠原蛋白的方法，包括如下步驟：

（1）將干凈的魚體廢棄物剪切成50～200目的魚粉；

（2）在密閉容器中加入魚粉，再加入蒸餾水、反應酶攪拌制成漿液，漿液在高壓、超聲處理下控制反應溫度為50～70℃，pH為7-9，攪拌0.5～2h；

（3）在步驟（2）反應后得到的漿液中加入少量氫氧化鈉，并加熱至80～90℃，攪拌20～30min；

（4）過濾漿液，濾液經透析得到透明的魚膠原蛋白溶液。

作為優選的技術方案：?

其中，如上所述的一種酶解法快速提取魚膠原蛋白的方法，步驟（2）中所述的蒸餾水質量為所述的魚粉質量的3～10倍。

如上所述的一種酶解法快速提取魚膠原蛋白的方法，所述的反應酶是指脂肪酶與蛋白酶的混合物；其中脂肪酶是指中性脂肪酶和/或堿性脂肪酶，蛋白酶是指菠蘿蛋白酶、堿性蛋白酶和/或胰蛋白酶。本專利中酶解脫脂和酶解提取是同步進行的：酶解脫脂是利用脂肪酶的酶解作用，在適宜的溫度和攪拌速率下，脂肪酶可以迅速將甘油三酯的酯鍵水解成為甘油和脂肪酸；酶解提取是利用蛋白酶的酶解作用，催化蛋白質中的肽鍵水解，從而得到魚膠原蛋白溶液。

進一步地，所述的反應酶加入質量占魚粉質量的0.1～1%，其中脂肪酶與蛋白酶的質量比為1:2～4。由于本專利中酶解脫脂和酶解提取是同步進行的，為了使酶解脫脂與酶解提取的速率相配合且互不干擾，必須嚴格控制脂肪酶與蛋白酶的使用量和使用比例。